基于LXR-ABCA1途径泽泻汤调节HDLC的机制探讨

批准号:
81001543
项目类别:
青年科学基金项目
资助金额:
20.0 万元
负责人:
薛偕华
依托单位:
学科分类:
H3117.中医养生与康复学
结题年份:
2013
批准年份:
2010
项目状态:
已结题
项目参与者:
吴松鹰、吴成翰、林菊珊、卢金华、张瑜、雷云、段佩鑫
国基评审专家1V1指导 中标率高出同行96.8%
结合最新热点,提供专业选题建议
深度指导申报书撰写,确保创新可行
指导项目中标800+,快速提高中标率
微信扫码咨询
中文摘要
泽泻汤出自《金匮要略》篇,是治疗痰饮之要方。临床及现代药理研究表明泽泻汤具有利水、扩张血管、调脂等的作用,但其作用机制研究少见,尤其调脂的机制研究较罕见。本课题立足于前期临床观察结果(泽泻汤对HDLC的调节作用),以大鼠腹腔巨噬细胞为研究对象,采用泽泻汤中药血清干预ox-LDLC负荷巨噬细胞,探讨该方中药血清对巨噬细胞内脂质分布影响,以及与LXR、ABCA1的关联性;在此基础上,进一步采用中药血清干预LXRE-luc荧光素表达质粒和ABCA1-EGFP质粒转染细胞,探索泽泻汤与LXR-ABCA1途径关联的内在分子机制,深入阐明泽泻汤调节HDLC的作用机制,进一步深化其调脂理论研究。
英文摘要
按照本课题的研究计划,我们如期完成研究任务。首先,我们成功建立了大鼠腹腔巨噬细胞的培养体系并制备出泽泻汤含药血清,并建立了ox-LDL(50mg/L)负荷的巨噬细胞泡沫化模型。然后经过MTS细胞活力检测试验筛选出20%泽泻汤血清浓度干预细胞,分为四组,空白组、ox-LDL组、ox-LDL+泽泻汤血清组、泽泻汤血清组。从而采用油红O染色和免疫荧光在形态学上观察到泽泻汤血清有抑制大鼠腹腔巨噬细胞脂质沉积的作用,而且分子学水平检测到泽泻汤血清通过上调LXRα促进ABCA1的表达,从而促进胆固醇逆转运,脂质外排。另外,我们也观察到泽泻汤血清可降低巨噬细胞源性泡沫细胞中MMP-9、IL-lβ的表达,从而抑制炎症因子在动脉硬化形成中的作用。LXRE-luc荧光素表达质粒转染293T细胞实验提示泽泻汤并不能直接识别LXRE激活LXR-ABCA1的表达,采用ABCA1-绿荧光表达质粒(ABCA1-EGFP)转染293T细胞,发现泽泻汤含药血清能够轻度增加ABCA1-绿荧光的表达,其机制可能是通过激活LXR从而增加ABCA1的表达或者通过延缓ABCA1蛋白的降解而起作用的。为进一步明确泽泻汤对LXRα的激活机制,我们超额进行构建3个不同长度包含ABCA1和LXRα启动子序列的DNA片段插入到PGL3-Promoter-luc荧光素酶质粒;目前已构建了ABCA1启动子-PGL3-luc荧光素酶表达质粒,正在测序验证该重组质粒的基因序列是否正确。而对于LXRα启动子-PGL3-luc荧光素酶表达质粒的构建,目前正在设计分段的不同酶切位点的引物,并且经过鉴定后的阳性克隆,送往公司测序.。对于上述的研究结果,目前已以论文的形式刊登2篇在《中国动脉硬化杂志》,另外一篇题目为“To observe the effect of Alisma Decoction on lipid metabolism and inflammatory response via activating LXRα pathway in macrophages-derived foam cells”文章已被“International Journal of Molecular Medicine”杂志(IF:1.9)接收。
期刊论文列表
专著列表
科研奖励列表
会议论文列表
专利列表
DOI:--
发表时间:2014
期刊:INTERNATIONAL JOURNAL OF MOLECULAR MEDICINE
影响因子:5.4
作者:薛偕华;陈彤;魏伟;陈立典;
通讯作者:
DOI:--
发表时间:2013
期刊:中国动脉硬化杂志
影响因子:--
作者:陈彤;魏伟;薛偕华
通讯作者:薛偕华
DOI:--
发表时间:2013
期刊:中国动脉硬化杂志
影响因子:--
作者:薛偕华;魏伟;陈彤;陈立典
通讯作者:陈立典
Effects of Alisma Decoction on lipid metabolism and inflammatory response are mediated through the activation of the LXR pathway in macrophage-derived foam cells
泽泻汤通过激活LXR介导脂质代谢和炎症反应
DOI:--
发表时间:2014
期刊:INTERNATIONAL JOURNAL OF MOLECULAR MEDICINE
影响因子:5.4
作者:薛偕华;陈彤;魏伟;陈立典
通讯作者:陈立典
DOI:--
发表时间:2013
期刊:中国动脉硬化杂志
影响因子:--
作者:薛偕华;魏伟;陈彤;陈立典;
通讯作者:
基于外泌体miR-193b-3p/1264-5p/3068-5p靶向TRPM2保护NVU探讨泽泻汤改善脑缺血再灌注损伤的机制
- 批准号:82274620
- 项目类别:面上项目
- 资助金额:52万元
- 批准年份:2022
- 负责人:薛偕华
- 依托单位:
基于SIRT1-LXRα通路探讨泽泻汤改善ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化的机制研究
- 批准号:81774380
- 项目类别:面上项目
- 资助金额:55.0万元
- 批准年份:2017
- 负责人:薛偕华
- 依托单位:
基于ERK1/2通路MicroRNAs调控探讨泽泻汤对AS VSMC迁移增殖的机制研究
- 批准号:81473744
- 项目类别:面上项目
- 资助金额:72.0万元
- 批准年份:2014
- 负责人:薛偕华
- 依托单位:
国内基金
海外基金
