单链抗体在大肠杆菌体内定点糖基化及通过糖链以共价键定向固定的研究
批准号:
31070822
项目类别:
面上项目
资助金额:
35.0 万元
负责人:
胡学军
依托单位:
学科分类:
C0801.固有免疫
结题年份:
2013
批准年份:
2010
项目状态:
已结题
项目参与者:
张媛媛、GerardWall、张学梅、杨彦杰、马君燕、李坤、陈娜娜、郭粉粉
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中文摘要
以共价键、高密度、定向固定抗体是提高免疫传感器敏感度及延长使用寿命的关键环节。单链抗体的应用,可大幅度提高单位面积固定抗体的密度。近来,我们应用空肠弯曲菌来源的pgl 基因簇,首次成功地在大肠杆菌中定点糖基化单链抗体,并保持原有生物活性。通过氧化糖链形成的醛基,可实现以共价键定向固定抗体在含有氨基的固体材料表面。本项目拟以抗软骨藻酸单链抗体为模型,从以下三方面进行研究:⑴研究不同糖基化位点修饰单链抗体对其生物活性和理化性质影响,提高糖基化后单链抗体理化性能;(2)优化大肠杆菌体内糖基化单链抗体条件,提高单链抗体糖基化效率;(3)研究不同位点糖基化单链抗体对以共价键定向固定单链抗体的影响,优化适合定向固定的糖基化位点。通过细致、深入研究单链抗体糖基化及其定向固定的研究,将提供高效生产理化性质稳定、适于以共价定向固定的单链抗体新途径,为进一步研发高敏感及高稳定的免疫传感器奠定基础。
英文摘要
本课题组应用空肠弯曲菌来源的pgl 基因簇,成功地在大肠杆菌中定点糖基化抗贝类毒素单链抗体2H12和抗荧光素单链抗体4M5.3。结果显示,在合适位点糖基化单链抗体并不影响单链抗体活性。本项目⑴系统研究了不同糖基化位点修饰单链抗体对其生物活性和理化性质影响;(2)优化了大肠杆菌体内糖基化单链抗体条件,提高单链抗体糖基化效率;(3)研究了不同位点糖基化单链抗体对以共价键定向固定单链抗体的影响,优化了适合定向固定的糖基化位点。(4)并围绕以上工作建立了低分子量、低相变温度的类弹性蛋白纯化系统。通过细致、深入研究单链抗体糖基化及其定向固定的研究,通过氧化糖链形成的醛基,实现了以共价键定向固定单链抗体抗体在含有氨基的固体材料表面,为进一步研发高敏感及高稳定的免疫传感器奠定基础。
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Covalent and Oriented Immobilization of scFv Antibody Fragments via an Engineered Glycan Moiety
通过工程聚糖部分共价定向固定 scFv 抗体片段
DOI:10.1021/bm301518p
发表时间:2013-01-01
期刊:BIOMACROMOLECULES
影响因子:6.2
作者:Hu, Xuejun;Hortiguela, Maria J.;Wall, J. Gerard
通讯作者:Wall, J. Gerard
DOI:--
发表时间:2013
期刊:中国生物工程杂志
影响因子:--
作者:林衡;李军明;葛高顺;张立超;孙利慧;胡学军
通讯作者:胡学军
DOI:--
发表时间:2012
期刊:生物技术通报
影响因子:--
作者:林衡;许崇波;孙利慧;胡学军
通讯作者:胡学军
DOI:--
发表时间:2013
期刊:微生物学通报
影响因子:--
作者:葛高顺;张立超;李军明;胡学军
通讯作者:胡学军
DOI:--
发表时间:2013
期刊:生命科学研究
影响因子:--
作者:张立超;李军明;葛高顺;孔令岭;胡学军
通讯作者:胡学军
N-糖基化修饰基因工程抗体大肠埃希菌底盘细胞构建
- 批准号:--
- 项目类别:面上项目
- 资助金额:54万元
- 批准年份:2022
- 负责人:胡学军
- 依托单位:
大肠埃希菌中功能性糖表位修饰重组抗体及其作用分析
- 批准号:32070936
- 项目类别:面上项目
- 资助金额:58万元
- 批准年份:2020
- 负责人:胡学军
- 依托单位:
大肠杆菌体内唾液酸修饰人源化N-糖基化单链抗体及其药代动力学研究
- 批准号:31370937
- 项目类别:面上项目
- 资助金额:70.0万元
- 批准年份:2013
- 负责人:胡学军
- 依托单位:
国内基金
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