单链抗体在大肠杆菌体内定点糖基化及通过糖链以共价键定向固定的研究

以共价键、高密度、定向固定抗体是提高免疫传感器敏感度及延长使用寿命的关键环节。单链抗体的应用，可大幅度提高单位面积固定抗体的密度。近来，我们应用空肠弯曲菌来源的pgl 基因簇，首次成功地在大肠杆菌中定点糖基化单链抗体，并保持原有生物活性。通过氧化糖链形成的醛基，可实现以共价键定向固定抗体在含有氨基的固体材料表面。本项目拟以抗软骨藻酸单链抗体为模型，从以下三方面进行研究：⑴研究不同糖基化位点修饰单链抗体对其生物活性和理化性质影响，提高糖基化后单链抗体理化性能；(2)优化大肠杆菌体内糖基化单链抗体条件，提高单链抗体糖基化效率；（3）研究不同位点糖基化单链抗体对以共价键定向固定单链抗体的影响，优化适合定向固定的糖基化位点。通过细致、深入研究单链抗体糖基化及其定向固定的研究，将提供高效生产理化性质稳定、适于以共价定向固定的单链抗体新途径，为进一步研发高敏感及高稳定的免疫传感器奠定基础。