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静磁场作用下LncRNA作为ceRNA介导miR-466d靶向抑制MMP13促进成骨分化的作用机制研究

批准号:
82060198
项目类别:
地区科学基金项目
资助金额:
34.0 万元
负责人:
童菲
依托单位:
学科分类:
口腔颅颌面组织器官缺损修复与再生
结题年份:
2024
批准年份:
2020
项目状态:
已结题
项目参与者:
童菲

项目摘要

结项摘要

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中文摘要
骨代谢与口腔疾病临床治疗密切相关,静磁场作为一种安全的物理因素对骨代谢有明显的调控作用。大量研究表明microRNA在调控骨代谢进程中发挥了关键作用,LncRNA也被证实可以作为ceRNA吸附microRNA参与调节骨代谢。本课题组前期研究发现静磁场作用下miR-466d能靶向抑制MMP13从而促进成骨,且研究结果提示lnc_LOC101928134可能通过靶向调控miR-466d进而影响成骨细胞的成骨分化。本项目拟采用RNA干扰技术探讨lnc_LOC101928134对骨代谢的影响,运用荧光素酶报告载体、慢病毒高/低表达、RNA结合蛋白免疫沉淀等技术探讨lnc_LOC101928134作为ceRNA结合miR-466d影响骨代谢的分子机制,阐明静磁场调控骨代谢的分子生物学机理,丰富磁生物学理论基础,并寻找骨改建过程中的关键靶点,为骨代谢相关口腔疾病靶向治疗探索新思路。
英文摘要
Bone metabolism is closely related to the clinical treatment of oral diseases. As a safe physical factor, static magnetic field can obviously regulate bone metabolism. A number of studies have shown that microRNAs play a key role in regulating bone metabolism, and long non-coding RNAs have been shown to act as a microRNA adsorber on ceRNA to regulate bone metabolism. Our previous research showed that miR-466d could inhibit MMP13 and promote osteogenesis, and the results suggested that lnc_LOC101928134 might affect osteoblast differentiation by targeting miR-466d. The aim of this study was to investigate the effect of lnc_LOC101928134 on bone metabolism by RNA interference, using luciferase reporter vector, lentivirus high/low expression, RNA binding protein immunoprecipitation and other techniques to explore the molecular mechanism of bone metabolism affected by lnc_LOC101928134 as ceRNA binding miR-466d, and to elucidate the molecular biological mechanism of static magnetic field regulating bone metabolism, to enrich the theoretical basis of magnetic biology, and to find the key targets in the process of bone remodeling, and to explore new ideas for targeted treatment of bone metabolism-related oral diseases.
骨是一种独特的具有自我修复和再生能力的器官,在正常生理状态下维持着骨沉积和骨吸收的平衡稳态。颌骨尤其是牙槽骨因其独特的生物学特性,展现出全身骨骼系统中最为显著的骨改建活性与适应性再生能力,这一特性已被证实为口腔医学多学科领域的重要生物学基础。磁场已被证实可以促进骨改建,但其促进骨改建的内在机制仍需要进一步研究。目前,大量研究表明microRNA在调控骨代谢进程中发挥了关键作用,lncRNA也被证实可以作为ceRNA吸附miRNA参与调节骨代谢。本项目首先验证了磁场可以促进成骨,然后通过高通量测序对差异表达lncRNA、miRNA进行筛选和鉴定,并通过qRT-PCR、Western-Blot、FISH等技术在大鼠成骨细胞或大鼠骨缺损模型中探究了以下内容:①miR-466d在磁场促进骨改建中的作用机制;②lncRNA Gas5(NONRATT008378.2)对成骨分化过程的影响;③lncRNA Gas5(NONRATT008378.2)与miR-182以及靶基因PCR在磁场促进骨改建中的作用机制。结果证实:①静磁场作用下miR-466d靶向抑制MMP13促进成骨细胞成骨分化;②lncRNA Gas5可下调miR-182、上调PKR的表达并促骨形成;③磁场通过lncRNA Gas5/miR-182/PKR轴促进骨形成。本项目阐明了lncRNA和miRNA参与静磁场调控骨改建的分子生物学机理,丰富磁生物学理论基础,为骨代谢异常相关口腔疾病提供精准治疗策略,推动磁场疗法在口腔医学中的转化应用。
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