基于NO/NF-κB信号偶联的民族药艳山姜调控血管内皮功能稳态机制研究

血管内皮炎性损伤是CVD的共同病理过程，本研究主要围绕EOFAZ对“NO/NF-κB”信号的调控保护作用。.第I部分 艳山姜对LPS诱导的HUVECs损伤的.保护作用及机制研究.目的：考察EOFAZ对LPS诱导的HUVECs损伤的保护作用及机制。方法：实验分为6组：空白、模型、阳性、挥发油各剂量组。采用HE、Gimsa染色法观察细胞，MTT法和LDH外漏分析细胞损伤，检测相关细胞因子，检测炎症因子iNOS、NF-ΚB mRNA和蛋白表达。结果：LPS诱导细胞炎性损伤，EOFAZ干预后，存活率明显升高、LDH外漏减少。上清液NO、PGI2含量增加，TXA2、ET-1、AngⅡ、IL-1、IL-6降低。药物降低HUVECs iNOS表达，抑制NF-ΚB激活。结论：EOFAZ对LPS诱导的HUVECs具有保护作用，机制与抑制炎症反应密切相关。.第II部分 艳山姜对自发性高血压大鼠（SHR）血管内皮损伤的保护作用及机制研究.目的：考察EOFAZ对SHR大鼠血管内皮的保护作用及机制。方法：高脂饲料诱导SHR大鼠建立高脂、高血压血管内皮损伤模型，观察药物对大鼠动脉血压、脂质代谢、动脉粥样硬化指数、心脏指数及左心室肥厚指数的影响，HE、维多利亚蓝弹力纤维染色观察大鼠主动脉血管形态学变化。检测血管内皮iNOS、NF-ΚB的mRNA和蛋白表达。结果：EOFAZ确切降低大鼠血压、改善脂质代谢、改善心脏指数、减少炎症介质释放，有效降低炎症因子iNOS表达，抑制NF-ΚB激活。结论：艳山姜挥发油对高脂SHR大鼠血管内皮具有保护作用，其抗炎、改善脂质代谢、心功能为其主要作用机制。.第III部分 艳山姜挥发油有效成分物质基础初探.目的：初步分析EOFAZ主要活性组分。方法：将EOFAZ中α-蒎烯，β-蒎烯，1,8-桉叶油醇，莰烯作为考察因素，每个因素选取有或无2个水平，按L8 (27)正交表设计给药。以细胞活力和NO分泌量为指标分析药效物质基础。结果：正交试验显示4个成分均能明显提高细胞存活率，作用主次顺序为莰烯>α-蒎烯>1,8-桉叶油醇>β-蒎烯，其中前二者具显著性差异。单成分分析表明4个成分具有保护作用，且呈剂量相关性。结论：4成分为EOFAZ有效物质成分，其中莰烯，α-蒎烯为其主要药效组分。