IFN-α对固有免疫分子TRIM22转录调控的机制研究

固有免疫分子TRIM家族蛋白在抗病毒免疫中发挥重要作用，是当前免疫学研究热点之一。我们的研究首次证实TRIM22分子可在乙肝体外和体内模型中显著抑制乙型肝炎病毒(HBV)的转录与复制，并发现TRIM22是肝细胞中被干扰素（IFN）诱导表达最强的TRIM家族分子之一，且在IFN抗病毒免疫中起到重要作用，本课题因而拟探究IFN诱导TRIM22表达的分子机制，以期研发出基于TRIM22分子的抗HBV新途径与新策略。我们鉴定出一在IFN诱导TRIM22表达中起到关键作用的顺式作用元件，我们将其命名为5'扩展的干扰素反应元件（5'eISRE）,进一步研究发现转录因子IRF-1通过与该反应元件结合，在IFN-α和IFN-γ调控TRIM22表达中均起到重要作用，其作用依赖于ATP依赖的核小体重构酶（BRG1）。进一步研究发现IFN通过活化JAK和PC-PLC/PKCα而非MAPK、PI3K/AKT/mTOR信号通路来调控TRIM22的诱导表达，其作用亦与5'eISRE与IRF-1的相互作用密切相关。尽管IRF-1在IFN诱导TRIM22等干扰素刺激基因（ISGs）的过程中起到关键作用，但IRF-1是如何通过与共活化子相互作用从而调控TRIM22表达的分子机制仍不清楚。我们的研究发现经IFN刺激后，共活化子p300与PCAF与IRF-1共结合在含5'eISRE 的TRIM22启动子区域；过表达及RNA干扰实验表明p300,而非PCAF,作为IRF-1的共活化子在TRIM22的诱导表达中起到关键作用，但这种作用不依赖于p300的组蛋白乙酰化酶活性，但却依赖于p300作为“桥梁”连接序列特异性的转录因子IRF-1和基础转录元件RNA多聚酶Ⅱ。近年研究发现HDAC活性在某些ISGs和其他细胞因子诱导基因的表达中发挥重要作用，但机制不明确。我们的研究结果发现: 将HDAC活性抑制后, 可促使HSP90的高乙酰化、阻断HSP90对IRF-1的分子伴侣作用，从而促进IRF-1与E3泛素化酶CHIP结合, 进而通过泛素/蛋白酶体通路降解IRF-1，进一步研究发现CHIP在TSA介导的TRIM22及其他IRF-1依赖的ISGs的转录调控中发挥重要作用。