NK细胞受体对汉滩病毒感染细胞的识别及其介导的免疫反应

2010年我们获得了国家自然科学基金项目：“NK细胞受体对汉滩病毒感染细胞的识别及其介导的免疫反应”，从2011.1开始执行。3年来，经课题组全体人员的共同努力，认真按申请书计划实施，先后采用流式细胞术、RT-PCR、ELISA、通透性测定等技术检测了HFRS患者NK细胞受体的表达和细胞因子水平以及HTNV感染的血管内皮细胞HLA-Ⅰ类分子、粘附分子、死亡受体等的表达，取得了一些阶段性实验结果和结论。①HTNV感染的血管内皮细胞HLA-A、B、C和HLA-E的表达明显升高，而HLA-G的表达没有明显变化。②HTNV感染HUVEC，其表面FAS/DR4/DR5的表达没有明显变化。粘附分子除ICAM-2/CD155的表达没有明显变化外，ICAM-1/VCAM-1/CD62P/ CD62E的表达均升高。③HFRS患者各病期之间及与正常人之间NK细胞亚群（CD56bright、CD56dim）比例没有明显差别。④在转录水平，HTNV单独刺激或HTNV感染的内皮细胞（EVC-304）可上调部分NK细胞活化型受体（NKp46、NKp44和NKG2D），但流式细胞术未检测到HFRS患者各病期之间及与正常人之间NK细胞活化性受体表达的明显差异。⑤NK细胞表面抑制性受体KIR2DL1和KIR2DL2/L3在HFRS患者不同期之间及与正常人之间的表达没有明显差异，但KIR2DL4的表达在发热期和低血压休克期的表达高于其他期和正常人。⑥HTNV刺激的NK细胞和HTNV感染的内皮细胞（EVC-304）与NK细胞共孵育，在培养上清中，发现Th1型代表性细胞因子IFN-γ和TNF-α的水平比未刺激的明显增加。⑦NK细胞与HTNV感染的血管内皮细胞共孵育，未引起通透性的显著变化。此外，尚有部分实验和资料整理正在进行中。上述已有的结果提示，NK细胞在HTNV感染致病中的作用可能主要是通过分泌细胞因子发挥作用，初步证实了课题设计时的思路，从而为肾综合征出血热的发病机制研究提供了新资料。