小剂量持续化疗联合树突状细胞生物免疫治疗抑制肺癌侵袭转移的分子机制

小剂量持续化疗以投予频繁的化疗药物与短暂休息间隔交替进行为特点，是目前针对肿瘤,尤其是肺部肿瘤的一种新颖疗法。我们的实验证实，在一定剂量的紫杉醇持续化疗联合树突状细胞（DC）的生物免疫治疗模式下，除了收获小剂量持续化疗本身抑制肿瘤新生血管的益处外，还可调节肺癌局部的微环境，而此种微环境中产生的细胞因子网络有利于树突状细胞发挥免疫监管的作用。本项目以细胞毒药物紫杉醇的小剂量持续化疗结合树突状细胞生物免疫疗法为基础，通过体外和体内实验两条途径，观察该联合治疗对小鼠肺癌的互补和叠加治疗效果；应用细胞分离、纯化、扩增及Transwell培养，荷瘤动物模型构建，细胞生物学与现代分子免疫学技术，微渗析仪结合 Luminex 分析等先进技术方法观察联合疗法对于减少荷瘤小鼠瘤体微环境中血管床面积、抑制血管内皮细胞增殖的作用。评价联合疗法对于调控瘤体内趋化因子、生长因子蛋白谱动态表达的影响；深入探讨联合疗法抑制或阻断癌细胞转移的机制。实验结果表明对骨髓细胞及树突状细胞（DC）无毒剂量下的小剂量紫杉醇可诱导肿瘤细胞的凋亡并刺激DC的分化成熟和功能的发挥。小剂量化疗联合DC免疫治疗在小鼠体内可显著增强抗瘤活性及抗肿瘤T细胞的分泌并可调节肿瘤微环境，增强抗肿瘤免疫应答，抑制肿瘤生长；联合疗法比之于单一的治疗方式获得生存获益，联合治疗能够延长荷瘤小鼠的生存。化疗联合树突状细胞对于晚期非小细胞肺癌患者具有提高生存率,改善生活质量的效应。DC/CIK免疫治疗联合化疗提高生存率的效应更多地体现在DC/CIK免疫治疗次数大于2 次及以上的患者。在荷瘤小鼠的模型中证明肺癌的产生,首先是regDC的聚集,然后是髓源性抑制细胞 (MDSC)的快速积聚。体内和体外实验证实:a):在肺癌的微环境中,cDC和MDSC都能转换成具有致癌潜能的regDC.b):cDC转换为regDC是通过小分子的Rho GTPase信号途径。而此途径能被非毒性的泰素所调控。c):预防regDC的出现能增强DC的抗肿瘤能力。本研究为肺癌靶向治疗的新方法提供了理论依据，为临床解决肿瘤侵袭转移提供了新的思路。