TRBP和PACT参与RNAi链偏好的机制研究

RNAi指双链RNA介导的、序列特异的基因沉默现象。外源或内源具有双链结构的小RNA需要在多种蛋白质的帮助下被传递，最终有一条链被RISC选中形成活性RISC。然而，我们在前期工作中发现，siRNA和shRNA的正义链和反义链都具有显著的RNAi效果，热力学因素对链偏好的影响并不显著，加上siRNA的种子区会通过miRNA途径产生脱靶效应，提示我们RISC链选择的偏好性会影响RNAi的特异性。本项目通过建立哺乳动物细胞内RNAi的RISC链偏好模型，分析多种链偏好现象的影响因素，尝试通过人为设计来有效控制RISC的链偏好以及RNAi的特异性。同时以TRBP和PACT为切入点，明确两种分子各自在RNAi过程中的独特作用以及它们影响RISC链选择/传递偏好的结构基础，从而揭示哺乳动物细胞RNAi链选择的偏好机制，为RNAi技术能够特异的应用于基因功能研究和临床药物开发提供理论保障。