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acrAB-tolC基因在大肠埃希菌对消毒剂苯扎溴铵和四环素类抗菌药物交叉耐药机制中的作用研究

批准号:
31372483
项目类别:
面上项目
资助金额:
15.0 万元
负责人:
吴俊伟
依托单位:
学科分类:
兽医药物学与毒理学
结题年份:
2014
批准年份:
2013
项目状态:
已结题
项目参与者:
魏述永、陈红伟、马保瑞、乐小丽、曾杨梅、宋小红、姜波、邓开锋

项目摘要

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项目成果

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中文摘要
研究消毒剂和四环素类抗菌药物之间的交叉耐药机制,为耐药性控制提供科学依据。选择消毒剂苯扎溴铵和四环素类抗菌药物为研究对象, 在前期研究表明二者交叉耐药且与外排泵机制高度相关的基础上,拟深入研究主要外排泵耐药基因acrAB-tolC在这一交叉耐药性中的作用。将大肠埃希菌质控株ATCC25922苯扎溴铵和土霉素诱导耐药株与野生耐药株的外排泵相关基因测序,分析研究野生耐药株及诱导前后大肠埃希菌qacA、qacC、qacE、emrE、mdfA、theA、acrA、tetB等基因变异,acrAB-tolC外排泵基因的克隆与表达,从而确认acrAB-tolC在该交叉耐药机制中的作用,为养殖业和医学临床正确使用消毒剂和抗菌药物提供理论依据,减少"超级细菌"的产生,保障养殖业的健康发展、食品安全和维护人类健康。
英文摘要
The aim of this study is to explore the mechanism of the cross resistance between Benzalkonium bromide and Tetracyclines, so as to provide scientific evidences of their resistance. As the cross resistance of Disinfectant and Tetracyclines, which is closely associated with some efflux pumps, has been proved by our studies, the function of acrAB-tolC in the cross resistance will be deeply studied in this research. To sequence the efflux pump genes of the Escherichia coli quality control strains ATCC25922 which is benzalkonium bromide and oxytetracycline-induced resistance strains and wild resistant strains, analysis and research the genovariation of wild resistant strains and qacA、qacC、qacE、emrE、mdfA、theA、acrA、tetB gene of Escherichia coli before and after the induction, then analysis and research the change of Efflux pump AcrAB-TolC, to confirm the acrAB-tolC’s function in this cross resistance mechanisms. So, this research will provide theory support for correctly using disinfectant and antibacterial agents so as to avoid the development of "superbugs", ensure the healthy promotion of breeding industry, food safety and keep human healthy.
本课题组近年来研究发现,因抗菌药物和消毒剂的大量滥用,导致自然界出现了对两者均耐药的超级细菌,而其交叉耐药机制未见报道,为此开展了本项目的研究。.1、临床耐药菌株分析:检测了临床分离的104株大肠埃希菌对13种抗菌药物及苯扎溴铵的敏感性及acrA、acrB、tolC 表达量。发现104株大肠埃希菌最高可对12种药物耐药,对土霉素、苯扎溴铵100%耐药,检测的菌株acrA、acrB、tolC 表达量均较质控菌极显著增加,表明自然界中确已存在对消毒剂和抗菌药物交叉耐药株,其交叉耐药与外排泵AcrAB-TolC的过量表达相关。.2、诱导耐药菌株交叉耐药性:利用药物梯度诱导法获得了对土霉素和苯扎溴铵均耐药的菌株A(土)和A(苯),土霉素的MIC分别是诱导前的320和250倍,苯扎溴铵均为18倍,表明大肠埃希菌在土霉素和苯扎溴铵长期单独作用下可产生对二者的交叉耐药。.3、acrAB-tolC作用研究:诱导菌株A(土)和A(苯)acrAB-tolC调控基因marA、soxS、rob与诱导前相比均发生了突变;与质控菌相应基因表达量相比, A(土)和A(苯)的marA、acrA、acrB、tolC表达量均显著或极显著增加,soxS极显著减少,A(土)rob极显著增加,A(苯)rob极显著减少。加入siRNA干扰marA可显著或极显著降低A(土)和A(苯)菌液的OD值,siRNA-120和siRNA-179可极显著提高土霉素在A(苯)和A(土)体内的蓄积量,土霉素、苯扎溴铵对构建的可过量表达marA的大肠埃希菌的MIC是质控菌的160倍和11倍。表明菌株A(土)和A(苯)marA基因表达量增加可提高acrAB-tolC的表达量,使其对土霉素和苯扎溴铵的敏感性降低,从而揭示了acrAB-tolC介导了两类药物的交叉耐药。. 可见抗菌药物土霉素与消毒剂之间存在交叉耐药性,其机制与外排泵耐药机制高度相关,提示人类日常生活及畜牧业生产中应防范滥用该两类药物所带来的风险。
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DOI: --
发表时间: 2011
期刊: 中国兽医杂志
影响因子: --
作者: [张静, 吴开菊, 马保瑞, 吴俊伟]
通讯作者: 吴俊伟
DOI: --
发表时间: 2013
期刊: 中国兽医杂志
影响因子: --
作者: [马保瑞, 刘三侠, 张静, 吴俊伟]
通讯作者: 吴俊伟
DOI: --
发表时间: 2012
期刊: 畜牧兽医学报
影响因子: --
作者: [张静, 刘晴晴, 马保瑞, 魏述永, 吴俊伟]
通讯作者: 吴俊伟
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