基于AGEs-RAGE信号转导通路探讨鬼箭羽治疗糖尿病肾病的作用机制
批准号:
82104748
项目类别:
青年科学基金项目(C类)
资助金额:
30.0 万元
负责人:
王瑾瑾
依托单位:
学科分类:
中医内科学
结题年份:
2024
批准年份:
2021
项目状态:
已结题
项目参与者:
王瑾瑾
中文摘要
临床研究表明鬼箭羽治疗糖尿病肾病(Diabetic kidney disease, DKD)具有较好的疗效,但对于其作用机制的研究却鲜有报道。随着网络药理学与生物信息学的发展,使得对中药作用机制的研究有了关联度较高的切入点。本研究在已有工作基础上,提出“鬼箭羽治疗DKD是经由AGEs-RAGE信号转导通路实现”的科学假说,并拟通过体内、体外实验在不同作用模式下进行干预研究,包括:(1)在体动物水平验证:建立DKD的大鼠模型,结合组织水平HE染色、免疫组化等技术获取鬼箭羽通过AGEs-RAGE信号通路,以及下游的促炎因子与/或血管内皮生长因子来调控治疗DKD的在体水平证据;(2)体外细胞水平验证:通过DKD模型原代培养肾脏肾小球系膜细胞和足细胞,检测相关靶基因的含量,进一步观察给药以及相应的激动剂与阻断剂后所产生的影响,从分子层面阐明鬼箭羽治疗DKD潜在的作用机制。
英文摘要
Guijianyu has achieved good clinical effects in the treatment of diabetic kidney disease (DKD), but the research on its related mechanisms is scarce. With the development of network pharmacology and bioinformatics, the research on the mechanism of Chinese medicine has a highly relevant entry point. Based on the existing work, this research puts forward the scientific hypothesis that "DKD treatment by ghost arrow feathers is achieved through the AGEs-RAGE signal transduction pathway", and plans to conduct intervention studies under different modes of action through in vivo and in vitro experiments, including: (1) Verification at the in vivo animal level: establish a rat model of diabetic nephropathy, combine with tissue-level HE staining, immunohistochemistry and other techniques to explore whether Guijianyu treats diabetic nephropathy through the AGEs-RAGE signaling pathway, as well as downstream pro-inflammatory factors and / Or vascular endothelial growth factor to regulate and establish research evidence at the in vivo level; (2) In vitro cell level verification: primary culture of renal glomerular mesangial cells and podocytes through diabetic nephropathy model to detect the content of related target genes , To further observe the effects of administration and the corresponding agonists and blockers, and to clarify the potential mechanism of the effect of ghost feathers on the molecular level.
临床研究表明鬼箭羽治疗糖尿病肾病(Diabetic kidney disease, DKD)具有较好的疗效,但对于其相关机制的研究却鲜有报道。随着网络药理学与生物信息学的发展,使得对中药作用机制的研究有了关联度较高的切入点。本研究在已有工作基础上,提出“鬼箭羽治疗DKD是经由AGEs-RAGE信号转导通路实现”的科学假说,并拟通过体内、外实验在不同作用模式下进行干预研究,包括:(1)在体动物水平验证:结合组织水平HE染色、免疫组化等技术获取鬼箭羽通过AGEs-RAGE信号通路,以及下游的促炎因子与/或血管内皮生长因子来调控治疗DKD模型鼠的在体水平证据;(2)体外细胞水平验证:通过观察鬼箭羽对晚期糖基化产物(AGEs)刺激的小鼠肾足细胞(MPC-5)的影响,检测相关靶基因的含量,进一步观察给药以及相应的激动剂后所产生的影响,从分子水平阐明鬼箭羽治疗DKD潜在的作用机制。.在体动物实验结果证实,与模型组比较,鬼箭羽中高剂量组小鼠血肌酐、尿素氮、尿蛋白/肌酐均降低(P<0.05),肾脏组织病理变化减轻,说明鬼箭羽可改善DKD小鼠的肾脏功能和结构;同时,本研究选取了AGEs-RAGE信号通路通路上的关键靶点RAGE(糖基化终末产物受体)、NF-κB(核转录因子)、IL-6(白细胞介素6)、VEGF(血管内皮生长因子)、TNF-α(肿瘤坏死因子-α)等进行在体实验验证,结果证实相较于模型组,鬼箭羽中高剂量组RAGE、NF-κB、VEGF、IL-6、TNF-α mRNA 及蛋白表达均降低(P<0.05)。.体外细胞实验结果证实,浓度为550mg/L的含鬼箭羽的培养基促进细胞增殖,降低凋亡水平效果最佳,而D-Ribose可逆转含鬼箭羽的培养基诱导的小鼠肾细胞增殖和凋亡抵抗;鬼箭羽能够降低RAGE、NF-κB、VEGFA、IL-6、TNF-α、Caspase-3蛋白和mRNA表达,D-Ribose可逆转鬼箭羽对MPC-5中RAGE、NF-κB、VEGFA、IL-6、TNF-α、Caspase-3蛋白和mRNA表达的改变。以上结果提示,鬼箭羽可以通过抑制AGEs-RAGE信号转导通路的激活,减少相关促炎细胞因子、血管内皮生长因子和凋亡因子的阳性表达水平,进而发挥改善晚期糖基化产物诱导糖尿病肾脏疾病小鼠足细胞损伤的作用。
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