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HSV-1激活HHV-8裂解性周期复制的分子机制
结题报告
批准号:
30900064
项目类别:
青年科学基金项目
资助金额:
20.0 万元
负责人:
秦娣
依托单位:
学科分类:
C0107.病毒学
结题年份:
2012
批准年份:
2009
项目状态:
已结题
项目参与者:
贾雪梅、王晶、葛高霞、樊卫飞、徐静、方欣
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中文摘要
卡波济肉瘤(KS)发病后大多预后差、病死率高。目前公认的KS病原体为人类疱疹病毒8型(HHV-8),HHV-8复制周期的调节在KS发生发展中起关键作用。然而HHV-8感染并非KS发生的充分条件,其它协同因子在KS致病过程中发挥着重要作用,这些协同因子包括单纯疱疹病毒1型(HSV-1)。.申请者最近的研究表明(Cell Microbiol, 2008, 10:713):HSV-1能够激活HHV-8裂解性周期复制;HSV-1使HHV-8"分子开关基因"-Rta启动子转录活性的虫荧光素酶值上升37倍;HSV-1感染释放的IL-10、4部分贡献于HHV-8复制。本项目的目的是寻找HSV-1作用于Rta启动子中特异性应答位点序列;鉴定参与该位点蛋白-DNA结合的转录因子;在IL-10、4活化的信号通路中寻找调控HSV-1激活HHV-8复制的关键信号通路。本项目的开展有助于阐明KS发病的分子机制。
英文摘要
在青年科学基金项目的资助下,我们运用分子克隆技术、虫荧光素酶报告基因分析、凝胶迁移分析(EMSA)和染色质免疫沉淀法(ChIP)等实验寻找到了单纯疱疹病毒1型(HSV-1)作用于人类疱疹病毒8型(HHV-8)分子开关蛋白RTA启动子区中的特异性应答位点序列及所参与的转录因子,HSV-1所对应的、能够主导RTA启动子活性的最小顺式调控区位于-133 bp和-95 bp之间,CREB和SP1是参与上述位点蛋白-DNA结合的转录因子。通过使用信号通路抑制剂、转染蛋白激酶的显性负相(DN)质粒和蛋白表达质粒等方法以及运用免疫印记(Western blot)、免疫荧光分析(IFA)和定量PCR(RT-qPCR)等实验,鉴定了调控HSV-1激活HHV-8裂解性复制的关键信号通路,其中PTEN/PI3K/AKT/GSK-3β通路发挥了重要作用,ERK MAPK信号通路也部分调节了HSV-1诱导的HHV-8复制(BMC Microbiol, 2011, 11:240)。另外,在完成青年基金规定的研究内容基础上,课题组还进行了有益的探索,发现了新的增长点,即进行“调控HSV-1激活HHV-8裂解性复制的miRNAs鉴定”研究。通过运用miRNA芯片、生物信息学软件预测、虫荧光素酶报告基因分析、功能获得和功能缺失等实验和技术,发现HSV-1通过下调细胞miR-498和miR-320d导致其靶基因Rta表达上调,从而激活HHV-8裂解性复制,促进病毒颗粒释放(PloS ONE,接受序号为PONE-D-12-31366R1 10.1371/journal. pone. 0055832)。以上研究均围绕一个主题即“HSV-1激活HHV-8裂解性周期复制的分子机制”来进行,研究结果有助于进一步阐明KS发病的分子机制。.在此基金的资助下,申请人以第一、共同第一和共同通讯作者身份发表SCI文章5篇,以通讯作者身份发表中文核心期刊文章5篇。另外,此基金也资助了有本人参与的另1篇SCI文章及另1篇中文核心期刊文章。
期刊论文列表
专著列表
科研奖励列表
会议论文列表
专利列表
DOI:--
发表时间:--
期刊:南京医科大学学报
影响因子:--
作者:朱小飞;秦娣;周峰;卫冰冰;卢春
通讯作者:卢春
DOI:--
发表时间:--
期刊:南京医科大学学报
影响因子:--
作者:吴婴南;倪杰;卢春;秦娣;朱玲
通讯作者:朱玲
DOI:10.1371/journal.pone.0055832
发表时间:2013
期刊:PloS one
影响因子:3.7
作者:Yan Q;Li W;Tang Q;Yao S;Lv Z;Feng N;Ma X;Bai Z;Zeng Y;Qin D;Lu C
通讯作者:Lu C
Human Immunodeficiency Virus Type 1 Tat Accelerates Kaposi Sarcoma-Associated Herpesvirus Kaposin A-Mediated Tumorigenesis of Transformed Fibroblasts In Vitro as well as in Nude and Immunocompetent Mice
人类免疫缺陷病毒 1 型 Tat 加速卡波西肉瘤相关疱疹病毒卡波辛 A 介导的体外转化成纤维细胞以及裸鼠和免疫功能正常小鼠的肿瘤发生
DOI:10.1593/neo.09494
发表时间:2009-12-01
期刊:NEOPLASIA
影响因子:4.8
作者:Chen, Xiuying;Cheng, Lin;Lu, Chun
通讯作者:Lu, Chun
DOI:--
发表时间:--
期刊:PLos One
影响因子:3.7
作者:Bai Z;Feng N;Gao SJ;Lu C
通讯作者:Lu C
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