基于中药多成分整体性特征研究桔梗汤的配伍机制

本项目基本按照研究计划实施。采用二甲苯所致小鼠耳廓肿胀模型研究了桔梗、甘草配伍前后抗炎作用的变化，结果表明配伍后两者具有一定的协同抗炎作用，而辅助/无效成分对有效成分的抗炎作用无明显改变。建立了桔梗汤、桔梗、甘草有效成群的指纹图谱和体内定量分析方法，从桔梗汤中初步鉴定出80个化学成分，其中13个来源于桔梗，67个来源于甘草。体外化学成分分析实验表明桔梗、甘草配伍前后各自主要有效成分的化学结构和含量未发生明显变化。药代动力学研究结果显示：桔梗、甘草配伍后，甘草可使桔梗皂苷D的药时曲线下面积（AUC）提高6倍，去芹菜糖-桔梗皂苷D提高2.2倍；桔梗组中桔梗皂苷D2的血药浓度低于定量限，而桔梗汤组中其血药浓度可在8 h内进行定量检测，因此桔梗皂苷D2的AUC值从0提高到134ng/mL*h，说明甘草能够显著提高桔梗皂苷类成分的口服相对生物利用度。桔梗可使甘草苷AUC值提高3.6倍，异甘草苷1.8倍，甘草素降低0.48倍，异甘草素降低0.63倍，甘草酸提高3倍，甘草次酸2.9倍，桔梗总体上能够显著提高甘草黄酮类、皂苷类成分的口服相对生物利用度。药代动力学研究与抗炎药效学实验结果基本一致，两者配伍后具有协同增效的作用。Caco-2细胞实验结果显示，桔梗、甘草配伍对有效成分的吸收影响不大；而肠道菌群试验结果表明：由于桔梗皂苷和甘草黄酮苷、皂苷均属于糖苷类成分，易受到β-D-葡萄糖苷酶等代谢酶的影响（脱糖基代谢），配伍后桔梗、甘草有效成分的代谢均受到一定程度的竞争性抑制，这可能是桔梗汤有效成分群生物利用度提高的一个主要因素。本项目通过中药多成分体内相互作用的探索性研究，揭示了桔梗汤中桔梗、甘草配伍的生物药剂学和药代动力学基础，从体内过程的角度阐明了桔梗汤的配伍机制和科学内涵。