基于RORC/FOXP3甲基化修饰探讨温阳化浊通络方调控系统性硬化病Th17/Treg平衡的作用机制
结题报告
批准号:
81774300
项目类别:
面上项目
资助金额:
53.0 万元
负责人:
卞华
依托单位:
学科分类:
H3108.中医内科学
结题年份:
2021
批准年份:
2017
项目状态:
已结题
项目参与者:
韩立、王倩、臧文华、张翠月、张瓅方、叶松山、王帅、刘涛
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中文摘要
自身免疫异常与系统性硬化病(SSc)的发生发展密切相关。Th17/Treg细胞失衡在SSc自身免疫功能紊乱中起着重要作用,是治疗SSc自身免疫异常的关键靶点。前期研究表明,温阳化浊通络方治疗 SSc临床效果显著,并能改善SSc患者体内Th17/Treg细胞失衡,增加外周血中FOXP3的mRNA表达水平,降低RORC、DNMT1/3A的mRNA表达水平。本项目拟从温阳化浊通络方通过影响RORC/FOXP3 DNA甲基化修饰从而调控Th17/Treg细胞平衡的角度出发,在体外淋巴细胞水平和SSc小鼠模型的整体水平上考察温阳化浊通络方对RORC/FOXP3甲基化修饰及Th17/Treg细胞分化、增殖、免疫激活/抑制功能等的影响,明确其改善SSc Th17/Treg细胞失衡的作用机制,探讨温阳化浊通络方通过改善Th17/Treg细胞失衡而发挥抗自身免疫反应的作用机制,为SSc的防治提供科学依据。
英文摘要
Autoimmune abnormality is closely related to the occurrence and development of SSc. Th17/Treg cell imbalance plays an important role in SSc autoimmune disorders and is a key target in the treatment of SSc autoimmune abnormalities. Our previous study indicated that Wenyang Huazhuo Tongluo Recipe (WYHZTLR) based on lung, spleen and kidney-skin correlation theory treated effectively SSc patients, which can improve the imbalance of Th17/Treg cells, and furthermore increase the mRNA expression level of FOXP3 in SSc patients peripheral blood and decrease the mRNA expression level of RORC,DNMT1/3A. The aim of this project was to investigate the effect of WYHZTLR on the balance of Th17/Treg cells via regulating RORC/FOXP3 DNA methylation. At the lymphocyte level and animal model of SSc level we will study the effects of WYHZTLR on the methylation of RORC/FOXP3 and the differentiation, proliferation, immune activation/inhibition of Th17/Treg cells, in order to reveal the meachnism of WYHZTLR improve imbalance of Th17/Treg cells. The systemic studies of anti-autoimmune response by WYHZTLR via improving the Th17/Treg cell imbalance can provide scientific basis for the treatment of SSc.
系统性硬化病(SSc)是一种以皮肤和内脏器官纤维化为主要特征的自身免疫性疾病,除皮肤外受累器官还包括消化道、肺脏、心脏及肾脏等,其发病机制集中在血管病变、免疫炎症及纤维化3个方面,免疫功能紊乱可能是SSc的重要致病因素。Th17/Treg失衡导致的自身免疫异常在SSc发展中起着关键作用。表观遗传学修饰异常,特别是FOXP3/RORC甲基化是SSc患者Th17/Treg细胞失衡的主要原因。本项目主要从温阳化浊通络方调控SSc Th17/Treg淋巴细胞的RORC/FOXP3 DNA甲基化的角度出发,在分离的SSc患者外周血Th17/Treg细胞和SSc模型小鼠中,采用CCK8、荧光定量PCR、流式细胞术、荧光素酶报告基因技术、Western blot、甲基化特异性PCR、MassArray甲基化检测等技术,观察温阳化浊通络方对Th17/Treg细胞增殖的作用,以及对RORC/FOXP3甲基化修饰相关分子的影响,探讨其作用机制。结果表明,在分离的人外周血Th17/Treg细胞中,SSc Th17/Treg细胞IL-17、RORγt、DNMT1、DNMT3A及DNMT3B上调表达,IL-10、FOXP3等下调表达,FOXP3甲基化增强。在人外周血Th17/Treg细胞和SSc小鼠模型中,温阳化浊通络方均具有:(1)抑制Th17细胞增殖、Th17细胞中IL-17、RORγt表达,促进Treg细胞增殖、Treg细胞中IL-10、FOXP3表达的作用;(2)抑制DNMT1、DNMT3A及DNMT3B蛋白和mRNA表达;(3)促进RORγt甲基化,抑制FOXP3启动子及TSDR甲基化。在SSc模型小鼠中,温阳化浊通络方可改善皮肤和肺病理及纤维化水平,减轻肺部炎症。上述结果提示,温阳化浊通络方能够通过干预RORC/FOXP3 DNA甲基化发挥调节Th17/Treg平衡的作用。本研究从细胞、整体水平阐明温阳化浊通络方调节SSc免疫失衡的作用机制,为SSc的理论研究及疾病防治提供科学支撑。
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DOI:10.3969/j.issn.1001-1528.2020.12.035
发表时间:2020
期刊:中成药
影响因子:--
作者:吕芹;韩立;丁生晨;郭克磊;臧文华;张鹏;卞华
通讯作者:卞华
Th17 cell-derived miR-155-5p modulates interleukin-17 and suppressor of cytokines signaling 1 expression during the progression of systemic sclerosis. Journal of Clinical Laboratory Analysis
Th17 细胞来源的 miR-155-5p 在系统性硬化症进展过程中调节白细胞介素 17 和细胞因子信号传导 1 抑制因子的表达。
DOI:--
发表时间:--
期刊:Journal of Clinical Laboratory Analysis
影响因子:2.7
作者:韩立;吕芹;郭克磊;李林运;张红;卞华
通讯作者:卞华
DOI:--
发表时间:2020
期刊:辽宁中医杂志
影响因子:--
作者:单雨;卞华;范黎明;刘涛
通讯作者:刘涛
DOI:--
发表时间:2020
期刊:中华中医药杂志
影响因子:--
作者:刘涛;卞华;孟庆良;王倩;范黎明;单雨
通讯作者:单雨
DOI:--
发表时间:--
期刊:中国医科大学学报
影响因子:--
作者:郭嘉;卞华;陈爽;单雨;卞博
通讯作者:卞博
低氧环境下温阳化浊通络方调控内皮细胞线粒体自噬和EndoMT改善SSc肺微血管损伤的作用机制
  • 批准号:
    82074415
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    56万元
  • 批准年份:
    2020
  • 负责人:
    卞华
  • 依托单位:
基于Wnt/β-catenin信号通路探讨温阳化浊通络方干预系统性硬化病纤维化的作用机制
  • 批准号:
    81373627
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    65.0万元
  • 批准年份:
    2013
  • 负责人:
    卞华
  • 依托单位:
国内基金
海外基金