一个Dbl家族新成员——K294的功能鉴定及与肿瘤恶性表型之间的关系

近些年研究表明，Rho家族通过细胞骨架的重组对肿瘤细胞的生长、分化、浸润、转移具有重要的调控作用，而Dbl家族癌基因又通过GTP-GDP交换控制着Rho家族分子的活性。在人类基因组计划完成后，我们利用大量解密的基因信息，通过生物信息学分析，发现了一个新的、重要的Dbl家族癌基因K294GEF。在本项目的研究中，我们用生物信息学软件对该基因进行了结构域分析及序列比对，发现该基因具有Dbl家族癌基因特有功能区--DHPH结构域，但是与大多数Dbl家族成员同源性较低。用Realtime荧光定量PCR检测了其在48种组织中的表达情况，结果显示在肺中表达最高；在转录因子活性分子试验中，我们通过双荧光素酶报告基因检测到该分子对myc及ISRE等下游小分子具有转录因子活性调控作用，提示该基因的下游信号通路可能与JAK-STAT信号通路有关；通过GST-Pulldown和免疫荧光检测发现K294GEF在体内的GEF活性主要是针对RhoA具有激活作用，并发现高表达K294GEF的细胞，其增殖、侵袭及体外成瘤能力均有明显增强的趋势，但是其迁移能力未见明显变化，说明K294GEF主要通过RhoA影响肿瘤的侵袭，增殖和成瘤能力。