罗非鱼性别分化的分子机制研究：转录因子对芳香化酶的调控作用

雌激素在非哺乳类脊椎动物的性别决定与分化过程中有非常重要的作用。芳香化酶是催化雌激素合成的关键酶。在罗非鱼，内源性雌激素是卵巢分化的天然诱导剂，芳香化酶（Cyp19a）从孵化后5天就开始在XX性腺中特异性表达。但是，芳香化酶基因的转录调控机制几乎是一片空白。本研究在克隆Wt1, SF-1, Foxl2, Dmrt1等转录因子的基础上，通过荧光实时定量PCR、启动子分析、凝胶迁移率检测、免疫共沉淀、转基因过量表达、显负性突变体干扰、酶联免疫激素测定、组织学、原位杂交和免疫组化等手段，研究这些因子，特别是Wt1和Dmrt1对Cyp19a基因的转录调控和调控机制。分析这些因子与芳香化酶基因启动子的结合能力以及与其他转录因子的相互作用。结合这些转录因子过量表达或功能受到干扰对单性罗非鱼性腺分化的影响和诱导性逆转能力，探讨这些转录因子在性腺分化中的作用，以期阐明鱼类性别决定与分化的分子机制。