tPA是目前唯一被美国FDA批准用于急性脑缺血的溶栓药物。但研究表明tPA除具有有益的溶栓功能外，还作为细胞因子在脑缺血中发挥不利作用。我们前期研究发现脑缺血后，tPA通过其受体LRP1可引起血脑屏障（BBB）通透性增加，最终将导致神经血管单元（NVU）的结构、功能破坏。本课题在已往工作基础上，进一步研究脑缺血后tPA-LRP1及其下游蛋白形成的信号通路，并探讨了该通路在NVU中的作用及相应机制。.我们发现，tPA与LRP1结合后激活了PI-3K/Akt，而pAkt表达增加与脑缺血后NVU通透性增加有关。我们给大脑中动脉阻断的野生型小鼠脑室内注射PI-3K-Akt/ Akt的特异性阻断剂Wortmannin。6小时后检查伊文斯蓝外渗率，以此显示BBB通透性。与对照组相比，Wortmannin组小鼠伊文斯蓝渗透率降低了57％+/-18％ 。.我们对大脑中动脉阻塞1小时后野生型小鼠和tPA基因敲除小鼠的脑组织提取物进行了免疫共沉淀的研究。结果表明，与野生型小鼠相比，tPA基因敲除小鼠及注射了受体相关蛋白RAP（LRP1受体阻断剂）的野生型小鼠，脑缺血引起的LRP1与pAkt相互作用明显减少。电镜结果显示LRP1胞内段(LRP-ICD)和pAkt共同存在于NVU的周围星形胶质细胞中。这些结果表明，在脑缺血的早期阶段，在血管周围的星形胶质细胞中tPA与LRP1的相互作用诱导Akt蛋白磷酸化。.NF-κB是pAkt的下游蛋白之一，我们将培养的野生型星形胶质细胞分两组，均暴露于氧糖剥夺状态，一组培养液中加入tPA, 另一组加入tPA及wortmannin, 然后通过免疫印迹分析p65（NF-κB的活化形式）的磷酸化水平。结果表明，tPA诱导了p65的磷酸化，而同时加入tPA和wortmannin，这一作用被明显抑制。因此，pAkt介导了tPA对NF-κB活化。.我们利用明胶酶谱法测定wortmannin处理组及非处理组野生型小鼠缺血脑组织提取物中MMP-9活性。结果显示Wortmannin组，缺血脑组织中MMP-9的活性明显降低。因此，tPA-LRP1-pAkt通路引起血脑屏障通透性增加与MMP-9激活有关。.总之，在脑缺血早期tPA和LRP1在NVU的星形胶质细胞中的相互作用激活pAkt介导的细胞信号通路，引起星形胶质细胞终足与管周基膜分离，最终导致BBB通透性增加