甘蓝型油菜隐性上位互作细胞核雄性不育抑制基因（esp）的克隆与功能分析

以甘蓝型油菜隐性上位互作核不育系9012A及其临保系为基本材料，采用BSA法结合AFLP技术筛选与隐性上位抑制基因(esp)紧密连锁的分子标记；并采用与拟南芥（白菜或甘蓝）的比较作图、遗传连锁图谱整合和目标BAC克隆测序等方法，开发与目标基因更加紧密连锁的PCR标记，进一步缩小目标区间，实现esp基因区间的精细遗传作图。利用亚基因组染色体步行的方法加快物理图谱的构建，并根据单倍型分析、比较作图及软件预测的方法鉴定出esp的候选基因。进而通过互补实验、RNAi和原位表达分析等手段结合细胞学观察分析该基因在雄配子发育中的功能。该本项目的实施，一方面可以克隆到具有自主知识产权的油菜隐性核不育上位抑制基因，探索该基因在油菜隐性核不育雄配子发育异常和育性恢复过程中的分子机理；另一方面可以开发用于esp基因标记辅助选择的PCR标记，甚至是功能标记，促进该不育系统在油菜杂交种生产中的快速利用。