SB转座子介导的斑马鱼基因捕获与突变研究

斑马鱼已成为发育和遗传学研究的理想模式动物，但缺乏胚胎干细胞和基于胚胎干细胞的基因敲除技术。ENU诱导的基因组突变、基因定位克隆和以此为基础的TILLING基因敲除技术，在斑马鱼突变体品系建立和基因功能研究方面正发挥着重要作用；然而，点突变的局限性和突变体鉴定方法的复杂性，决定了相关技术尚不能满足斑马鱼基因功能研究快速发展的需要。近年来，利用SB和Tol2转座子介导的基因组插入突变方法，已在模式鱼胚胎发育过程中鉴定出一些重要的功能基因，但整体效率低，亦未获得可稳定遗传的突变体品系。在深入研究SB转座机制和分析现有基因捕获载体缺陷的基础上，本课题设计、构建和完善两个由SB转座子介导的高效基因捕获载体，用于斑马鱼胚胎发育过程中功能基因的捕获；这两个载体可在捕获内源基因的同时阻断其表达，允许获得突变体品系。因此，该研究将为斑马鱼基因功能研究提供新技术平台，亦为斑马鱼基因突变体库的建立奠定基础。