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自体乳糜化脂肪来源间充质干细胞外泌体(ADSCs-Exos)调控皮肤DETC细胞功能促进创面愈合的作用及机制

批准号:
82101839
项目类别:
青年科学基金项目(C类)
资助金额:
30.0 万元
负责人:
徐潇
学科分类:
炎症、感染与免疫
结题年份:
2024
批准年份:
2021
项目状态:
已结题
项目参与者:
徐潇

项目摘要

结项摘要

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中文摘要
自体脂肪来源间充质干细胞治疗皮肤损伤创面的机制主要基于脂肪来源干细胞外泌体(ADSCs-Exos)促进血管新生、免疫调节等作用。既往研究发现ADSC可调控T细胞缓解创面炎症反应加快愈合速度,其中分布于表皮组织的树突状表皮T细胞(DETC)在创面愈合中发挥重要作用。ADSCs-Exos可通过激活Wnt /β-catenin 信号传导促进创面愈合,此信号通路可能参与ADSCs-exos调控DETC调节炎症反应促进创面愈合的过程。本项目通过自体乳糜脂肪来源ADSCs-Exos注射皮肤全层创面动物模型创缘,观察注射前后TGF-β、wnt/β-catenin信号通路关键蛋白、DETC创面愈合关键因子的差异性表达,以及抑制wnt3a后,与ADSC-Exos共培养的DETC中几种关键蛋白表达变化,从分子水平明确wnt信号通路在ADSCs-Exos诱导DETC促进创面愈合作用机制,为临床应用奠定理论基础。
英文摘要
The mechanism of autologous adipose-derived mesenchymal stem cells in the treatment of skin wounds is mainly based on the effects of adipose-derived stem cells exosomes (ADSCs-Exos) in promoting angiogenesis and immune regulation.Previous studies have found that ADSCs can regulate T cells to alleviate the inflammatory response of wounds and accelerate the speed of wound healing, among which Dendritic epidermal T cells (DETC) distributed in epidermal tissues play an important role in wound healing.ADSCs-Exos can promote wound healing by activating Wnt /β-catenin signaling, and this signaling pathway may be involved in the process of ADSCs-Exos regulating DETC to reduce inflammation and promote wound healing.This project by autologous chyle fat derived ADSC - Exos full-thickness skin wounds animal models and injection, observed the differences in the expression before and after injection of TGF - beta, WNT/β - catenin signaling pathway key protein, DETC wound healing the key factor, as well as after the inhibition of wnt3a,the changes of several key protein expression.DETC cultured with ADSCs-Exos, definite the mechanism of Wnt signaling pathways in ADSCs -Exos induced DETC promote wound healing from the molecular level, to lay a theoretical foundation for clinical application.
脂肪来源间充质干细胞(ADSCs)具有促进创面愈合的作用,但其具体机制目前尚无定论。脂肪来源干细胞外泌体(ADSC-exosomes, ADSC-Exos)因细胞间通讯中重要作用参与创面愈合促血管生成、免疫调节抗炎等多种生理病理过程。在创面炎症阶段,ADSC-Exos主要基于其免疫调节作用降低炎症反应促进创面愈合。既往研究发现ADSC-Exos可以通过调控免疫细胞重要组分T淋巴细胞的活化与分化,促使其分泌炎症因子缓解创面炎症反应。有研究表明,经典信号通路Wnt/β-catenin通路主要参与细胞发育和再生的控制以及组织稳态,与创面愈合密切相关。但是否是ADSC-Exos干预巨噬细胞促进创面愈合的主要机制仍未知。于是为了进一步评估ADSC-Exos对创面免疫微环境的具体作用,首先我们验证了ADSC-Exos介导Wnt/β-catenin通路相关蛋白的表达情况,以及ADSC-Exos对巨噬细胞作用的分子机制,发现IL-33在HaCat细胞的增殖中起着关键作用,ADSC-Exos可以减轻巨噬细胞Il33缺乏对HaCat细胞增殖的抑制作用且ADSC-Exos具有抑制RAW264.7细胞IL-6和TNF-α分泌、促进IL-33分泌的能力。且ADSC-Exos可通过刺激BMDMs分泌IL-33来促进HaCat细胞的增殖。而后我们通过构建小鼠背部全层损伤模型,以及RNA测序和分析鉴定了RAW264.7细胞中的DEGs。验证了ADSC-Exos可通过上调IL-33,调控Wnt/β-catenin信号通路。证实巨噬细胞可以在ADSC-Exos的作用下,通过Wnt/β-catenin信号通路间接调节角质形成细胞。其次本研究还分别构建了人体皮肤T细胞(HuT 78细胞,αβT细胞)和小鼠皮肤T细胞(DETC,γδT细胞)的体外炎症模型,利用免疫刺激剂以及ADSCs-exo对皮肤T细胞进行处理,发现HuT 78在激活状态下,ADSCs-exo能够降低其表面活化标志物的表达,抑制炎症因子的释放。同时也能通过上调PI3K/Akt通路,缓解HuT 78细胞的凋亡及增殖抑制效应。本研究为ADSCs-exo在创面免疫微环境的调控机制方面提供了新的视野。
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