树突状细胞迁移的分子机制及其在RA发病机制中的作用

本课题通过4年努力，基本按计划完成了预定研究任务，并有重要发现。研究内容包括：探究树突状细胞（Dendritic cells, DCs）迁移的分子机制及其在RA发生发展中的作用，重点研究基质金属蛋白酶-9（Matrix metalloproteinase-9, MMP-9）在DCs迁移中的作用及机制，阻断MMP-9能否抑制DCs 的体内外迁移；在RA模型中，探究阻断MMP-9是否通过抑制DCs迁移而抑制RA的发病及进展，并围绕其进行深入研究。. 在本研究中，我们利用抗MMP-9 抗体 (anti-MMP-9 antibody, α-MMP-9) 阻断小鼠体内的MMP-9，观察其对RA小鼠模型——胶原诱导型关节炎（collagen-induced arthritis, CIA）的作用，发现α-MMP-9能够明显延迟模型鼠关节炎的发病，降低CIA关节评分，减轻CIA小鼠关节内炎性细胞和炎症因子TNF-α及IL-1β的浸润，同时显著降低了CIA小鼠血浆中炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6及IL12p-70的水平。进一步流式分析结果显示，α-MMP-9治疗组小鼠引流淋巴结中DCs的数目明显低于未治疗的CIA小鼠；同时，体外细胞实验也显示应用α-MMP-9或者MMP-9抑制剂（MMP-9 inhibitor, MMP-9i）处理小鼠骨髓来源树突状细胞（Bone marrow-derived DCs, BMDCs）后能够显著降低BMDCs穿过基质胶向Transwell下层小室迁移的数目；MMP-9i明显降低BMDCs从小鼠足掌皮下迁移到同侧腘窝淋巴结的数目。除此之外，我们还将CFSE标记的MMP-9-/- BMDCs和野生型（Wild type, WT）BMDCs注射到MMP-9-/-和WT小鼠足掌皮下，48小时后检测各组DCs迁移到同侧腘窝淋巴结的数目。结果显示：不管是在MMP-9-/-还是WT小鼠体内，MMP-9-/- BMDCs从小鼠足掌皮下迁移到同侧腘窝淋巴结的数目明显低于WT BMDCs，这提示DCs自分泌的MMP-9才是影响其迁移的关键分子，而旁分泌的MMP-9对DCs迁移无明显影响。上述结果告诉我们DC来源的MMP-9是调节DCs迁移的关键分子；通过阻断MMP-9抑制DCs的迁移有潜力在将来成为治疗RA及其他类似自身免疫性疾病的新策略。