去分化软骨肉瘤中SOX9、RUNX2与TCF1蛋白相互作用的机制研究

批准号:
81172544
项目类别:
面上项目
资助金额:
54.0 万元
负责人:
汤小东
依托单位:
学科分类:
H1802.肿瘤发生
结题年份:
2015
批准年份:
2011
项目状态:
已结题
项目参与者:
杨荣利、孙馨、任婷婷、卢新昌、娄志远、彭显博
国基评审专家1V1指导 中标率高出同行96.8%
结合最新热点,提供专业选题建议
深度指导申报书撰写,确保创新可行
指导项目中标800+,快速提高中标率
微信扫码咨询
中文摘要
软骨肉瘤是常见的原发恶性骨肿瘤,术后复发的病例易发生去分化改变,去分化软骨肉瘤预后极差,对放化疗不敏感,其去分化机制尚未明确。我们前期研究表明去分化软骨肉瘤中SOX9基因低表达而RUNX2基因高表达,两者都是决定软骨细胞分化的关键基因,参与了软骨肉瘤去分化的改变过程,而TCF1在去分化软骨肉瘤细胞系中表达增高。文献报道表明SOX9与TCF1之间有相互抑制作用,而RUNX2则受到TCF1的上调,我们通过蛋白芯片技术筛选到两者都可能与TCF1发生蛋白相互作用,但需要进一步证实。本课题拟通过GST pull-down技术检测SOX9、RUNX2与TCF1的蛋白相互作用,并利用荧光素酶报告基因技术、CHIP技术、EMSA技术明确其蛋白作用的具体机制;利用siRNA技术通过体外及体内实验研究TCF1在软骨肉瘤去分化中对SOX9、RUNX2的作用,初步揭示软骨肉瘤去分化的机制。
英文摘要
软骨肉瘤(CS)是常见原发恶性骨肿瘤,术后复发的病例易发生去分化改变,去分化软骨肉瘤(DDCS)预后差,其去分化机制尚未明确。本项试验应用western blot 检测临床标本(8例普通软骨肉瘤标本,8例去分化软骨肉瘤标本)中TCF-1的表达情况,并应用免疫组化检测85例不同级别软骨肉瘤及去分化软骨肉瘤病理切片中TCF-1的表达情况。并分析其与患者临床预后之间的关系。结果表明,TCF-1在去分化软骨肉瘤中的表达水平高于普通软骨肉瘤,且TCF-1表达水平高者,其临床预后较差。然后,我们进行了荧光素酶报告基因(luciferase)、染色质免疫共沉淀(chip)、电泳迁移率变动分析实验(EMSA),其结果表明,TCF-1可以正向调控runx2的表达,负向调控sox9的表达,且TCF-1与runx2的启动子区有直接结合作用,而与sox9启动子区无直接结合作用。最后,我们应用敲除TCF-1的去分化软骨肉瘤细胞系(NDCS-1)及过表达TCF-1的普通软骨肉瘤细胞系(SW1353)进行体内外侵袭性试验。其结果表明,TCF-1下调后,NDCS-1细胞系的增殖能力显著下降,凋亡水平明显增加,成瘤能力显著下降,细胞表型也发生相应改变,而在TCF-1过表达的SW1353细胞系中结果则相反。该实验结果表明,TCF-1在去分化软骨肉瘤的发生中起到重要的作用,其作用可能是通过调控runx2和sox9的表达而实现,该分子有望成为预示软骨肉瘤患者临床预后的一个重要指标,且其有望成为去分化软骨肉瘤药物治疗的一个有效靶点。
专著列表
科研奖励列表
会议论文列表
专利列表
CCL5/CCR5轴通过调控免疫微环境促进脊索瘤血管拟态生成的机制探究
- 批准号:82373140
- 项目类别:面上项目
- 资助金额:48万元
- 批准年份:2023
- 负责人:汤小东
- 依托单位:
circUSP34 /miR-16-5p/ Smad3正反馈环在脊索瘤发生发展中的作用及其机制研究
- 批准号:81972509
- 项目类别:面上项目
- 资助金额:55.0万元
- 批准年份:2019
- 负责人:汤小东
- 依托单位:
Sox9基因在软骨肉瘤去分化中的作用
- 批准号:30700838
- 项目类别:青年科学基金项目
- 资助金额:17.0万元
- 批准年份:2007
- 负责人:汤小东
- 依托单位:
国内基金
海外基金
