调控家蚕发育非编码RNA(non-coding RNA, ncRNA)的功能解析
结题报告
批准号:
31172158
项目类别:
面上项目
资助金额:
60.0 万元
负责人:
阚云超
依托单位:
学科分类:
C0405.动物资源与保护
结题年份:
2015
批准年份:
2011
项目状态:
已结题
项目参与者:
乔惠丽、徐安凤、焦铸锦、邓培渊、高美娟、王银娟、陈敏
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中文摘要
课题组在前期研究家蚕50-500nt非编码RNA(non-coding RNA,ncRNA)过程中,发现40个新的ncRNA参与家蚕发育调控。为进一步研究这些ncRNA的功能,本研究拟采用Northern 杂交分析40个新的ncRNA在家蚕不同组织中的表达模式。用40个ncRNA作为探针制备Biacore芯片,提取家蚕主要发育阶段(胚胎期、幼虫期、蛹期和成虫期)总蛋白,利用Biacore 3000实时分析ncRNA和蛋白之间的相互作用。筛选与ncRNA互作的蛋白质,质谱分析鉴定其组成和种类。同时采用免疫共沉淀技术证实这些蛋白质和ncRNA的特异相互作用。收集实验数据,构建调控家蚕发育的ncRNA与蛋白质互作的数据库。结合ncRNA的组织特异性表达模式,解析ncRNA与蛋白质相互作用对家蚕发育的分子调控机制。
英文摘要
课题组在前期构建家蚕50-500nt非编码RNA(non-coding RNA,ncRNA)文库中,发现40个新的ncRNA可能参与家蚕发育调控。为进一步研究这些ncRNA的功能,本研究采用Northern 杂交和荧光定量PCR研究40个ncRNA在家蚕不同组织中的表达模式,同时对部分ncRNA的功能进行了探索。结果发现,40个差异表达的ncRNA在家蚕不同发育阶段大都呈组成型表达。但在家蚕5龄幼虫不同组织中研究发现,11个ncRNA在丝腺中富集,其中4个ncRNA(Bm-51、Bm-152、Bm-159和Bm-163)在丝腺中存在特异表达。进一步分析ncRNAs在丝腺不同部位的表达情况,发现4个ncRNA(Bm-51、Bm-100、Bm-102和Bm-163)在前丝腺富集,其中Bm-102在后丝腺不表达;而另外3个ncRNA(Bm-101、Bm-152和Bm-159)在后丝腺富集。对部分丝腺富集的ncRNA的结合蛋白进行研究发现,Bm-102和Bm-159可能通过组蛋白复合体参与丝腺发育;另外Bm-152可能通过与snoRNA蛋白复合体相互作用来调控其互补链基因的表达;个体中过表达Bm-152促进家蚕5龄龄期缩短,促使家蚕提前上蔟。同时,我们发现部分ncRNA能够在幼虫不同生殖器官富集,其中12个ncRNA在精巢中高表达,包括5个snoRNA和7个不能归类的ncRNA,且大部分snoRNA为孤儿snoRNA,没有预测的靶标基因。其中的Bm-51、Bm-68和Bm-163在精巢中的表达量远高于卵巢,尤其是Bm-68,在精巢中表达量为卵巢中的11倍,个体瞬时转基因结果显示,雌虫中过表达精巢富集的 Bm-68会诱导dsxM上调。另外4个ncRNA(Bm-86、Bm-100、Bm-101和Bm-170)在卵巢中高表达。个体瞬时过表达卵巢富集ncRNA Bm-86会诱导dsxF:dsxM比例上调,表明Bm-68和Bm-86可能参与家蚕性别的发育调控。本研究对家蚕50-500nt ncRNA的时空表达谱进行了系统的研究;并通过垂钓与ncRNA互作的蛋白发现了部分ncRNA可能通过蛋白质复合体参与家蚕发育;同时通过个体的转基因实验发现部分ncRNA可能在家蚕丝腺发育及性别决定中发挥重要调控功能。本研究从非编码RNA角度为探索家蚕发育的分子调控机制开拓了新的思路。
期刊论文列表
专著列表
科研奖励列表
会议论文列表
专利列表
DOI:--
发表时间:2014
期刊:安徽农业科学
影响因子:--
作者:郭兴国;邢万静;阚云超;乔惠丽
通讯作者:乔惠丽
DOI:--
发表时间:2012
期刊:河南农业科学
影响因子:--
作者:阚云超;CHEN Min1,2,LI Dan-dan2,QIAO Hui-li2,LU Nan2, WEN Zhen-zhong3;2.Henan Key Laboratory of Funiushan Insect Biology, Nanyang N;3.Pingdingshan University,Pingdingshan 467000,China)
通讯作者:3.Pingdingshan University,Pingdingshan 467000,China)
DOI:--
发表时间:2014
期刊:中国农学通报
影响因子:--
作者:黄蕾;江千令;阚云超;李丹丹
通讯作者:李丹丹
DOI:--
发表时间:2015
期刊:昆虫学报
影响因子:--
作者:吴博;张丹;阚云超;李丹丹
通讯作者:李丹丹
DOI:--
发表时间:2015
期刊:蚕业科学
影响因子:--
作者:庞振凌;樊玉宁;乔惠丽;阚云超
通讯作者:阚云超
家蚕长链非编码RNA参与调控脂肪体发育和细胞自噬的机制研究
  • 批准号:
    32070503
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    58万元
  • 批准年份:
    2020
  • 负责人:
    阚云超
  • 依托单位:
家蚕神经系统piRNA的系统挖掘及功能解析
  • 批准号:
    31470114
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    30.0万元
  • 批准年份:
    2014
  • 负责人:
    阚云超
  • 依托单位:
家蚕嗅觉受体与气味结合蛋白或信息素结合蛋白在嗅觉发生中的功能的研究
  • 批准号:
    30700070
  • 项目类别:
    青年科学基金项目
  • 资助金额:
    18.0万元
  • 批准年份:
    2007
  • 负责人:
    阚云超
  • 依托单位:
国内基金
海外基金