RNA干扰缺氧诱导因子-1α对肉鸡腹水形成的影响
批准号:
31402266
项目类别:
青年科学基金项目
资助金额:
24.0 万元
负责人:
刘平
依托单位:
学科分类:
临床兽医学
结题年份:
2017
批准年份:
2014
项目状态:
已结题
项目参与者:
黄爱民、王立琦、熊金、宗益波、张萌萌
中文摘要
缺氧诱导因子-1α(HIF-lα)是一种重要的蛋白质调节因子,参与机体缺氧时各种细胞因子表达调控,并在多种疾病中起着关建作用。研究表明:HIF-lα表达与肉鸡 AS 发生密切相关,但关于HIF-lα与肉鸡 AS 冶疗作用机制的研究尚不清楚。因此,本项目以肉鸡为实验动物,利用 RNA 干扰HIF-lα基因进行体内外实验。体外实验是构建慢病毒表达载体—HIF-lα-shRNAi,再转导肉鸡肺动脉内皮细胞(PAEC)中,检测 HIF-1α、VEGF、ET-1表达水平;体内实验是肉鸡体内注射 HIF-lα-shRNAi 重组质粒,以检测血液中HCT、Hb、MDA 等生理生化指标以及组织中 HIF-1α、VEGF、ET-1表达水平。探讨 RNA干扰 HIF-lα在肉鸡 PAEC 中的作用机制,最终阐明 RNA 干扰 HIF-lα表达与肉鸡 AS 发生关系,为实现肉鸡 AS 的治疗提供新的思路。
英文摘要
Hypoxia-inducible factor-la (HIF-lα) is a kind of important proteins regulating factor, involving in regulation expression when the body lack oxygen; and to play a key role in many diseases. Previous studies have shown that HIF-lα expression is closely related to broilers AS, but its research mechanism is not clear that HIF-lα with broilers AS therapy. Therefore, this study takes broilers as experimental animals, and used RNA interference in vivo and in vitro experiments. The vitro experiment is to construct a virus expression vector HIF-lα-shRNAi, and transduction into primitive broilers pulmonary artery endothelial cells (PAEC) under hypoxia, and HIF-1α, VEGF and ET-1 mRNA expression of cell will be detected; The vivo experiment is broilers that HIF-lα-shRNAi plasmids will be taken under the wing intravenously, through detection of biochemical indexes HCT, Hb and MDA etc. in blood, and HIF-1α, VEGF and ET-1 mRNA expression of organization will be detected; explore the mechanism of RNA interference HIF-lα in broilers PAEC, and finally clarify RNA interference HIF-lα expression associated with broilers AS, in order to provide new ideas for the treatment of broilers AS.
缺氧诱导因子-1α(HIF-lα)是一种重要的蛋白质调节因子,参与机体缺氧时各种细胞因子表达调控,并在多种疾病中起着关建作用。研究表明:HIF-lα表达与肉鸡 AS 发生密切相关,但关于HIF-lα与肉鸡 AS 冶疗作用机制的研究尚不清楚。因此,本项目以肉鸡为试验动物,通过腹水综合征复制、RNA 干扰HIF-lα等试验,利用 RNA-seq、荧光定量 PCR、Western Blot、细胞凋亡等检测方法以验证 RNA 干扰 HIF-lα 基因在肉鸡 PAEC 中的效果。同时,初步探了中药丹参酮IIA对肉鸡腹水综合征的防治效果。结果表明:①在腹水综合征复制试验中发现了鸡生长缓慢并伴肺动脉的病变,肺动脉RNA-seq检测显示腹水鸡和正常鸡有895个差异表达基因,其中缺氧因子 HIF-1α存在差显著的变化,并参与了其重要的代谢通路;且miR-155、miR-489-3p, miR-1662, miR-460b-5p, miR-144-3p and miR-30e-5p对HIF-1α起了关键调控作用。② RNA 干扰HIF-lα基因在肉鸡的PAEC试验中,HIF-lα、TGF-β、ET-1、VEGF基因表达比对照组显著降低;转录组测序结果中,RNA 干扰HIF-lα 基因组在缺氧3h情况下与其它组相比存在较多基因差异显著,特是与正常组相比高达1276差异显著基因,且这些差异基因富集到了Focal adhesion、Calcium signaling pathway、Cell adhesion molecules、Ecm-receptor interaction等重要代谢通路。这说明了HIF-lα 基因与肉鸡腹水综合征的发生及肺动脉重构有着密切关系。③中药丹参酮IIA对肉鸡腹水综合征的有明显防治效果。总之,通过上述的研究,从整体、细胞和分子水平上了解了HIF-lα 基因与肉鸡腹水综合征的相互关系,部分阐明了HIF-lα 基因与肉鸡腹水综合征的机理,也为防治肉鸡腹水综合征提供了一定的理论基础,也对养鸡业发展具有重要学术和生产意义。从比较医学上,为人类心血管疾病研究提供有价值的借鉴。
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DOI:
--
发表时间:
2017
期刊:
江西畜牧兽医杂志
影响因子:
--
作者:
[涂凌云, 黄烨祯, 韩银华, 刘佩, 李婷婷, 刘平]
通讯作者:
刘平
DOI:
--
发表时间:
2017
期刊:
江西畜牧畜医杂志
影响因子:
--
作者:
[涂凌云, 韩银华, 黄烨祯, 刘佩, 李麟, 黄露佳, 张丽媛, 李婷婷, 刘平]
通讯作者:
刘平
Tanshinone IIA protects against pulmonary arterial hypertension in broilers
丹参酮 IIA 可预防肉鸡肺动脉高压
DOI:
10.3382/ps/pew322
发表时间:
2017-05-01
期刊:
POULTRY SCIENCE
影响因子:
4.4
作者:
[Hu, Guoliang, Song, Yalu, Liu, Ping]
通讯作者:
Liu, Ping
Transcriptome Analysis and Gene Identification in the Pulmonary Artery of Broilers with Ascites Syndrome.
腹水综合征肉鸡肺动脉的转录组分析和基因鉴定
DOI:
10.1371/journal.pone.0156045
发表时间:
2016
期刊:
PloS one
影响因子:
3.7
作者:
[Yang F, Cao H, Xiao Q, Guo X, Zhuang Y, Zhang C, Wang T, Lin H, Song Y, Hu G, Liu P]
通讯作者:
Liu P
Dysregulated expression of microRNAs and mRNAs in pulmonary artery remodeling in ascites syndrome in broiler chickens.
肉鸡腹水综合征肺动脉重塑中 microRNA 和 mRNA 的表达失调
DOI:
10.18632/oncotarget.12888
发表时间:
2017-01-10
期刊:
Oncotarget
影响因子:
--
作者:
[Liu P, Yang F, Zhuang Y, Xiao Q, Cao H, Zhang C, Wang T, Lin H, Guo X, Hu G]
通讯作者:
Hu G
共 7 条
MiR-30e-5p靶向RPS14基因调控Ribosome翻译在肉鸡腹水综合征肺动脉重构中的作用
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批准号:32460906
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项目类别:地区科学基金项目
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资助金额:32.00万元
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批准年份:2024
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负责人:刘平
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依托单位:
MiR-125b-5p通过靶向JAK2/STAT3信号通路轴影响肉鸡腹水综合征肺动脉重构的分子机制研究
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批准号:31960723
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项目类别:地区科学基金项目
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资助金额:41.0万元
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批准年份:2019
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负责人:刘平
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依托单位:
国内基金
海外基金