miR200和let7介导胰腺癌干细胞去干性化的反向EMT机制研究

上皮间质转化过程（EMT）在胰腺癌侵袭过程中起重要作用。我们通过研究miR-200和let7家族在胰腺癌干细胞中的表达，探讨miR-200和let7家族在胰腺癌EMT过程中的作用。方法：我们通过流式分选仪从胰腺癌细胞系PANC-1中分选出CD24+CD44+ESA+三阳性的干细胞（PCSCs），通过RT-qPCR检测PCSC和PANC-1中miR-200与let7家族的表达，通过miR-200a mimic转染PCSCs和miR-200a inhibitor、let7f和miR-98 mimics和inhibitors转染PANC-1，检测miR-200a、let7f和miR-98表达与EMT相关性。结果：PCSCs显示EMT表型，其miR-200a的表达显著低于未分选胰腺癌细胞系PANC-1，PANC-1细胞中let7f和miR-98的表达显著低于胰腺细胞HPDE6c7。并且PCSCs呈现EMT相关表型。转染了miR-200a mimic后PCSCs中EMT特征基因的表达发生了改变，N-cadherin、Vimentin和ZEB1 mRNA的表达显著降低而E-cadherin的表达显著增加，PCSCs细胞形态学明显向上皮细胞形态发生转变；PANC-1细胞转染miR-200a inhibitor后 EMT特征基因的表达发生了改变，N-cadherin、Vimentin和ZEB1 mRNA的表达显著升高而E-cadherin的表达显著降低，PANC-1细胞形态学明显向间质细胞形态发生转变。转染let7f和miR-98 mimics后PANC-1中EMT特征基因MMP-11的表达显著降低而E-cadherin的表达显著增加，PANC-1细胞形态学明显向上皮细胞形态发生转变；PANC-1细胞转染let7f和miR-98 inhibitors后 MMP-11的表达显著升高，PANC-1细胞形态学明显向间质细胞形态发生转变。同时，过表达miR-200a显著降低PCSCs的侵袭和迁移能力，而抑制miR-200a表达显著提高了PANC-1的侵袭和迁移能力。过表达let7f和miR-98显著降低了PANC-1的侵袭和迁移能力，而抑制let7f和miR-98表达显著提高了PANC-1的侵袭和迁移能力。 结论： miR-200a，let7f和miR-98介导了胰腺癌反向EMT过程。