一种新颖的基因缺陷型EV71活疫苗的研究

EV71病毒感染可引起无菌脑膜炎、小脑脑炎及急性肌肉无力麻痹等神经系统并发症，其神经细胞毒性是引起婴幼儿重症手足口病死亡的重要病因，目前尚无有效药物和疫苗。在本项目中，我们将依据EV71 复制及包装的原理，利用慢病毒系统构建能稳定表达P1蛋白转化Vero细胞系；利用反向遗传学和基因重组技术构建基因缺失型EV71复制子；将该复制子转化到稳定表达P1蛋白的细胞系后，获得能在转化细胞内无限复制而在非转化细胞内一次性感染的P1基因缺陷型的EV71病毒。通过细胞学实验，确定该病毒在细胞内复制特性；通过动物免疫实验，检测血液中和不同组织中细胞因子、炎症因子和中和保护抗体，确定该病毒诱导中和抗体和各种细胞因子的效果；通过临床症状观察，病理切片，不同组织内病毒含量的定量检测，确定其作为疫苗的安全性。探讨一种有别于传统疫苗产生的活疫苗产生的新模式，提供一种安全，高效、能规模化生产的新型EV71疫苗技术平台。