NK细胞杀伤效应诱导乳腺癌细胞免疫编辑后耐受的机制研究

本课题已构建多次NK杀伤诱导的乳腺癌细胞MDA-MB-231免疫耐受亚株，芯片分析亲本细胞与之区别，miR320和miR29表达显著下调，HSP20、70分子明显上调，并与BAT3结合由胞质转位于胞膜并释放入培养基。可溶性BAT3作为配体，可封闭Nkp30，抑制NK细胞对肿瘤细胞的杀伤。课题进一步引入CTC 细胞，应用HTA芯片检测CTC与手术标本长非编码RNA（lcnRNA）,ECT, SNP,mRNA和miR差异，发现12个lcnRNA和转录因子CREB、STAT1 及c-jun等 8 个转录因子的 mRNA 均高于手术原发灶标本，与 CREB 共 Hostgene 的 miR-372（与miR302同一Cluster）呈同向高表达。生物信息预测提示，CREB调控MHCI 类分子(HLA-Bw 和 C1/2)及 HSP70 的表达，及 NK 细胞抑制性细胞因子TGFβ的分泌调节。课题还应用VitD处理MDA-MB-231细胞，发现miR-302c和miR-520c 表达下调，而NK细胞活化受体NKG2D配体MICA/B及ULBP2上调，对NK细胞杀伤敏感性相应上调。课题发现通过ADM渐次提高浓度诱导耐药亚株的MDA-MB-231/ADM的miR-663启动子去甲基化高表达，靶向调控HSPG2和CCBP2在调节耐药的同时可能参与其免疫调节。