大麻素WIN靶向PPARγ基因抗肝细胞癌增殖及其信号转导通路研究

为了探讨大麻素WIN和THC激活大麻受体对肝癌细胞增殖和凋亡的作用，并对其机制进行初步探讨。该课题将肝癌细胞（HepG2和BEL-7402）分成对照组、不同剂量大麻受体激动剂处理组。MTT及细胞克隆形成等方法测定WIN和THC对肝癌细胞细胞增殖的影响；DNA梯度电泳法检测其细胞凋亡DNA片段，流式细胞术等检测分析各组细胞凋亡率变化，Western blot及定量RT-PCR等分析各组细胞caspase-3和c-myc以及PPAR-γ的蛋白表达等，分光光度法检测caspase-3、8、9的活性，凝胶迁移实验（EMSA）检测PPAR-γ的活性。结果是大麻受体激动剂WIN和THC能抑制肝癌细胞生长和c-myc的蛋白表达，诱导肝癌细胞凋亡，上述效应具有剂量依赖性。提示WIN和THC可能通过诱导细胞caspase-3 的蛋白表达和激活caspase-3、8、9活性进而诱导肝癌细胞凋亡，并与c-myc以及PPAR-γ的蛋白表达相关，PPAR-γ介导了大麻素诱导的肝癌细胞凋亡。肝癌裸鼠动物模型验证了WIN的抑瘤效果。该研究为大麻类物质治疗肝癌的临床应用研究奠定了一定的基础。.阶段性成果：1..该研究成果主要以1篇核心期刊论文发表的形式提供，另一篇SCI论文已经投稿至anticancer research杂志。.2..培养了两名硕士研究生：王映及肖顺华，均于2012年6月顺利答辩毕业并获得优秀毕业研究生奖励。.3..参加国内学术会议一次，参会论文题目: Apoptosis induced in HepG2 cells by WIN55,212-2 : Involvement of PPARγ and c-myc。.4.本人2012年12月29日举办学术会议一次，邀请美国明尼苏达大学hormel癌症研究所的廖德仲教授来广州医学院讲学。