基于DNA pooling的全基因组筛选PCI术后抗血小板治疗效应的遗传标记及评价

双重抗血小板治疗（阿司匹林和氯吡格雷）是冠心病患者经皮冠状动脉介入治疗（PCI）术后预防发生不良临床终点事件的最重要治疗措施。本课题先对药动学和药效学通路上候选基因和单体型对PCI术后双抗1年内MACE和出血事件的影响进行研究；然后用全外显子组测序发现与PCI术后出现MACE或出血事件有关的基因变异；最后在功能上，阐明基因启动子变异对转录活性的影响，或对基因表达和阿司匹林与氯吡格雷抗血小板效应的影响。本研究入选了1500接受PCI术和使用双抗治疗冠心病患者。患者合并高血压或合并糖尿病时，MACE发生风险相对较高，HR（95%CI）分别为3.47（1.52-7.84）和2.46（1.32-4.552.72），而射血分数越高，出现MACE的风险越低 [0.98（0.96-1.00）]。携带CYP2C19*2患者出现MACE风险增高（校正P = 0.0098），但出血风险降低（校正P = 0.0016）。PON1 Q192R与PCI术后6个月内出血风险相关联。与最常见单体型(GGTAG)和第二常见单体型(GGCAA)相比，含有PON1 -126C的单体型(ACCAA)是出血易感因素。野生型单体型质粒（p-162A-126C-108C）的转录活性最高，三个突变的单体型质粒p-162G-126G-108T活性最低（P < 0.05）。ADRB1和ADRB2基因的三个变异与 PCI术后1年出现MACE不相关。ADRB1和ADRB2基因变异与CYP2C19*2和PON1基因变异之间在MACE上没有交互作用。全外显子组测序结果发现与PCI术后患者1年内出现MACE和6个月出血出血事件有关的的基因变异有177和169个，其中参与氯吡格雷代谢的CES1基因9个位点与出血相关。在功能上，CES1 rs28516466突变型对阿司匹林治疗后血小板抑制效果显著比野生型差（P=0.013），通过分析其对基因表达的影响，发现rs28516466是一个基因表达数量性状位点。携带CES1 rs28516466 野生基因型的肝S9组分代谢生成MP-H4量显著高于突变基因（P < 0.05）。总之，本研究提示CYP2C19和PON1基因变异可能是预测抗血小板治疗冠心病患者出血风险的遗传因素；发现了CES1 rs28516466是一个影响双抗效应的原因性基因变异。