基于耐高温mutS蛋白、pfu DNA聚合酶、dU修饰寡核苷酸探针的SNP检测技术
结题报告
批准号:
30700131
项目类别:
青年科学基金项目
资助金额:
17.0 万元
负责人:
刘喜朋
依托单位:
学科分类:
C0509.生物学过程与代谢
结题年份:
2010
批准年份:
2007
项目状态:
已结题
项目参与者:
候敬丽、邹亚娟、王剑、郑艳、周立强
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中文摘要
与含dU碱基双链DNA结合,pfu DNA聚合酶不能催化DNA延伸反应。如果dU处于错配碱基附近,MutS蛋白与DNA中错配碱基的结合将阻止pfu DNA聚合酶与含dU的DNA结合,使pfu DNA聚合酶能够催化DNA延伸反应。利用这一特征,建立独特的SNP检测技术。进行PCR循环的SNP检测反应溶液含有dU修饰的寡核苷酸探针,单链DNA检测目标,报告DNA模板及其上下游引物,MutS蛋白和pfu DNA聚合酶。若寡核苷酸探针与检测目标完全配对,MutS不能与杂合分子结合,含dU碱基的DNA将与pfu DNA聚合酶结合,阻止报告DNA模板的PCR扩增反应;反之,含有错配碱基的杂合分子能够与MutS结合,不能与dU双链DNA结合的pfu DNA聚合酶可以催化报告基因PCR扩增。利用这种技术进行HLA分型,证实本法检测结果准确、操作简便、灵敏度高、与现有实验室方法和设备兼容,具有广阔应用前景。
英文摘要
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Expression and characterization of thymine-DNA glycosylase from Aeropyrum pemix
Aeropyrum pernix 胸腺嘧啶 DNA 糖基化酶的表达和表征。
DOI:10.1016/j.pep.2009.10.006
发表时间:2010-03-01
期刊:PROTEIN EXPRESSION AND PURIFICATION
影响因子:1.6
作者:Liu, Xi-Peng;Li, Chun-Peng;Liu, Jian-Hua
通讯作者:Liu, Jian-Hua
A novel single nucleotide polymorphism detection of a double-stranded DNA target by a ribonucleotide-carrying molecular beacon and thermostable RNase HII
通过携带核糖核苷酸的分子信标和热稳定性 RNase HII 对双链 DNA 靶标进行新型单核苷酸多态性检测
DOI:10.1016/j.ab.2009.10.042
发表时间:2010-03-01
期刊:ANALYTICAL BIOCHEMISTRY
影响因子:2.9
作者:Liu, Xi-Peng;Hou, Jing-Li;Liu, Jian-Hua
通讯作者:Liu, Jian-Hua
The terminal 5 ' phosphate and proximate phosphorothioate promote ligation-independent cloning
末端 5' 磷酸酯和邻近的硫代磷酸酯促进不依赖于连接的克隆
DOI:--
发表时间:--
期刊:Protein Science
影响因子:8
作者:Liu, Xi-Peng;Liu, Jian-Hua
通讯作者:Liu, Jian-Hua
古菌复制型DNA解螺旋酶CMG复合物的结构功能研究
  • 批准号:
    --
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    58万元
  • 批准年份:
    2021
  • 负责人:
    刘喜朋
  • 依托单位:
决定古菌DHH家族磷酸酯水解酶底物特异性的结构研究
  • 批准号:
    U1832161
  • 项目类别:
    联合基金项目
  • 资助金额:
    54.0万元
  • 批准年份:
    2018
  • 负责人:
    刘喜朋
  • 依托单位:
古菌RecJ-like核酸酶参与校正RNA引物3'末端错配核糖核苷酸的分子机制研究
  • 批准号:
    31371260
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    80.0万元
  • 批准年份:
    2013
  • 负责人:
    刘喜朋
  • 依托单位:
国内基金
海外基金