疫霉菌激发子诱发的调控过敏性细胞死亡的基因克隆及功能分析

以农杆菌为宿主菌、利用病毒载体PVX构建不同疫霉菌激发子处理后的本氏烟(Nicotiana benthamiana)的cDNA文库，将文库中的所有克隆分别通过农杆菌注射接种N. benthamiana不同植株，使其体内的基因沉默；不同的疫霉菌激发子分别注射处理上述基因沉默的烟草，筛选过敏性细胞死亡表型改变的克隆；测序分析，进而筛选cDNA文库或采用RT-PCR和RACE技术克隆全长基因，进一步利用基因沉默技术和农杆菌介导转化瞬时过量表达分析上述克隆基因在疫霉菌激发子诱发的过敏性细胞死亡中的作用机制；同时利用酵母操作系统分析候选基因对不同胁迫因子诱发酵母细胞死亡的调控作用，揭示所克隆基因对细胞死亡调控是否具有保守性。研究结果对解释植物的过敏性细胞死亡及其对疫霉菌非寄主抗性的分子机制、设计持久广谱的抗疫病工程具有重要价值，获得的调控过敏性细胞死亡的基因可望为抗病育种提供新的抗病相关基因资源。