6-溴异香兰素作用于DNA-PKcs/Akt信号通路克服癌细胞耐药性及机制研究

6-溴异香兰素是我们前期研究筛选到DNA-PKcs的抑制剂，能抑制Akt的磷酸化和活性，提高HepG2细胞对化疗药物的敏感性。进一步采用RNA干扰手段构建DNA-PKcs的siRNA载体，筛选出DNA-PKcs蛋白表达抑制的肝癌细胞模型，并且比较三种化疗药物（DRB、DDP、VP16）对DNA-PKcs表达抑制的HepG2-H1细胞的影响，发现三种药物均能抑制HepG2-H1细胞生长，导致细胞周期紊乱，6-溴异香兰素诱发的有丝分裂灾变死亡与抑制细胞中DNA-PKcs蛋白表达有关。通过建立表达绿色荧光蛋白的HepG2细胞系，并利用活体成像系统检测荷瘤鼠体内肿瘤的生长情况，研究发现6-溴异香兰素可抑制荷瘤鼠体内肿瘤生长，对荷瘤鼠体重以及外周血白细胞无明显的毒性作用。免疫组化实验显示6-溴异香兰素治疗组肿瘤组织中DNA-PKcs表达水平低于对照组，表明6-溴异香兰素具有荷瘤鼠体内的抗肿瘤活性，抑制肿瘤生长作用与降低组织中DNA-PKcs表达有关，与离体细胞学结果一致。6-溴异香兰素与射线联合作用显著抑制荷瘤鼠肿瘤的生长，表明6-溴异香兰素提高荷瘤鼠体内肿瘤的辐射增敏效应，并且对荷瘤鼠心、肝、肾无明显的毒性作用。. 通过此研究，揭示癌细胞耐药新机制，为发展肿瘤分子靶向治疗、克服癌细胞耐药的新措施提供实验依据和研发基础。