Slit2介导白细胞定向迁移的分子机制研究

本项目证明了Slit2/Robo1信号对以中性粒细胞浸润为主的急性肺炎模型有抑制作用，而对以嗜酸性粒细胞浸润为主的哮喘模型有促进作用。Slit2在炎症刺激下高表达，其在肺组织中形成的浓度梯度调控了嗜酸性粒细胞和中性粒细胞的趋化迁移。本项目揭示了Slit2抑制趋化运动（中性白细胞）和促进趋化运动（嗜酸性粒细胞）的分子机制依赖于Slit2-Robo1下游信号分子srGAP1的表达差异及其对两类白细胞中Cdc42与PI3K信号平衡的调节，发现srGAP1是胞内决定Slit2调控方向的中心分子，并确认了Slit2刺激胞内PI3K活化主要通过催化亚基p110-γ，检测了Naf1α及Src激酶在介导Robo1与p85结合中的潜在作用。本项目还利用IP-MS进一步尝试寻找了Robo1结合蛋白中介导p85结合的新分子。同时我们还为下一步的工作构建筛选了基因敲除小鼠及ELISA检测试剂盒等研究工具。本项目阐明了Slit2对两类白细胞趋化运动提供不同调控方式的分子机制，提示了Slit2可能成为调控白细胞定向迁移及体内炎症的潜在分子靶标，为新药物的研究开发提供了线索。在第一部分工作完成的同时，我们还在筛选鉴定白细胞与淋巴细胞发育分化相关一些新基因，其中发现Pcid2参与淋巴细胞的谱系建立及维持干细胞的自我更新。观察到Pcid2及其结合蛋白EID1在干细胞自我更新与分化调控上的重要生理意义，确认了Pcid2对EID1/p300转录调控复合体的作用机制。