nm23-H1调控microRNAs逆转肺癌转移表型的分子机制研究

本课题对项目任务书中的研究内容进行了深入细致的研究，达到了预期研究目标。应用miRNA表达谱芯片筛选到一组nm23-H1调控并参与肺癌侵袭转移过程的miRNA，并进行了real-time PCR验证。深入研究发现：nm23-H1过表达可上调mir-610、mir-132、mir-449a和mir-223的表达水平，mir-610、mir-132、mir-449a和mir-223在高转移肺癌细胞中的表达水平显著低于其在低转移肺癌细胞中的表达水平，它们在转移淋巴结组织的表达水平显著低于原发肿瘤组织中的表达水平；mir-610可抑制肺癌细胞的增殖和侵袭能力，GJA3为miR-610的靶基因；mir-132可抑制肺癌细胞的侵袭能力，ZEB2为mir-132的靶基因，ZEB2在高转移肺癌细胞中高表达，在转移淋巴结组织中的表达水平显著高于其在原发肿瘤组织中的表达水平，将ZEB2过表达可促进肺癌细胞的侵袭能力，同时干扰mir-132和ZEB2表达可削弱单独干扰mir-132引起的细胞侵袭能力的增强作用，mir-132通过靶向调控ZEB2表达抑制肺癌细胞的侵袭；nm23-H1可激活miR-449a启动子活性，miR-449a可抑制肺癌细胞的增殖，促进细胞凋亡，抑制细胞的侵袭能力，建立了miR-449a抑制肺癌转移的动物模型，miR-449a可抑制肿瘤的形成和转移， miR-449a的靶基因为MAP2K1，还调控p-MEK、p-ERK、p-c-fos、p-c-jun和MMP2的表达水平，在miR-449a启动子上找到了3个可能的AP1结合位点，组蛋白甲基化和乙酰化修饰影响miR-449a的表达水平；mir-223在肺癌和食管癌细胞中均高表达，在肺癌和食管癌组织中的表达水平显著低于其在正常组织中的表达水平，ARTN 为mir-223的靶基因，干扰ARTN表达可降低细胞侵袭能力，mir-223过表达可降低MMP2和MMP9的蛋白表达水平。通过课题研究，发表了2篇SCI论文，3篇核心期刊论文，培养了3名博士研究生和3名硕士研究生。