利用核糖体DNA基因进行孢子丝菌鉴定及杂交分型

孢子丝菌病是较为常见深部真菌病，目前诊断较为困难。菌种的地域差异和致病性尚不清晰。研究孢子丝菌核糖体DNA基因可能对该菌的鉴定和分型有意义。本课题旨利用我科收藏的国内外５５株孢子丝菌及200份临床组织标本，应用Southen blotting 杂交方法对孢子丝菌进行种内分型，确定种内核糖体基因的异同，并与随机扩增多态性分型和线粒体DNA限制性片段长度多态性分型进行比较。探讨孢子丝菌的基因学特征、ＤＮＡ分型及其与临床表现和地域分布的关系、各菌株之间的基因学共性。在此基础上对以往文献报告和我们在基因分型中发现和制备的探针和引物进行筛选，以得到真正对孢子丝菌特异的探针和引物，然后利用原位杂交和ＰＣＲ各自的优点及将两者结合的原位ＰＣＲ技术，检测动物及临床标本中的病原菌.进而将整套诊断程序标准化，以达到从基因水平对孢子丝菌病进行分型和准确、快速诊断的目的,为准确、及时治疗提供依据。