基于TLR4介导急性前葡萄膜炎的大黄多糖干预机制研究

本课题基于目前对急性葡萄膜炎在发病机制和治疗上的盲点，通过观察大黄多糖对葡萄膜炎中TLR4 信号通路关键分子的影响，寻找大黄多糖治疗TLR4 介导的葡萄膜炎的可能靶点，从炎症的源头阻止葡萄膜炎的发生和发展，为防治葡萄膜炎的治疗提供一种新的思路和途径。第一阶段的研究中我们通过对RAW264. 7小鼠巨噬细胞系进行PBS正常对照组，地塞米松组，大黄多糖组，大黄多糖+地塞米松处理的不同处理，发现在体外细胞系中大黄多糖可以通过激活TLR4复合物及MyD88、NF-κB p65来激活巨噬细胞，因此理论上大黄多糖可以作为LPS的竞争性抑制物。第二阶段的研究中我们收集HLA-B27阳性急性前葡萄膜炎患者及白内障患者外周血并分离单核细胞，给予LPS刺激和大黄多糖干预，发现LPS可诱导HLA-B27相关前葡萄膜炎恢复期患者外周血PBMC培养上清液中细胞因子水平变化，大黄多糖可以抑制细胞因子释放，但其作用强度低于地塞米松。分析中发现可能与大黄的提取工艺与纯度相关，于是我们又将另一多糖含量多的中药红芪引入试验。第三阶段我们通过对wista大鼠给予PBS正常对照组，LPS组，LPS+地塞米松组，LPS+红芪多糖组处理，发现红芪多糖能通过抑制TLR4 介导的信号通路来抑制LPS诱导的急性前葡萄膜炎。我们通过对不同提纯工艺红芪多糖对TLR4 介导的信号通路的抑制作用研究得出结论：红芪多糖对虹膜睫状体组织内TLR4及相关分子通路、人外周血单核细胞表面TLR4及相关分子通路具有明显的抑制作用，红芪多糖可以从LPS- TLR4- MyD88-NF-κB传导途径的源头阻止炎症扩大，从而改善葡萄膜的免疫状态，达到抗炎的作用。为防治急性前葡萄膜炎提供一条新的思路和途径。