调控miRNA-141抑制膀胱癌转移和降低化疗耐药性的双重作用研究

膀胱尿路上皮癌是泌尿外科的常见肿瘤，而且发病率在逐年增高，研究其发病、发展机制最终有助于其治疗。本课题不仅研究了miR-141在尿路上皮癌中与上皮-间质转化（EMT）之间的关系，并且将研究扩展至所属的miR-200家族，这不仅是完成了预定的课题计划，而且还对课题下一步的研究方向作了探索。实验通过改变miR-200家族成员的表达来研究其对膀胱癌细胞EMT状态、侵袭转移能力、基质金属蛋白酶-2和9（MMP-2,9）的表达和对顺铂的耐药情况的影响。研究首先在五种膀胱癌细胞中检测miR-200家族的表达，发现五个家族成员在CRL1749细胞中表达最低，而在HTB9中表达最高，其中miRNA-141和miRNA-200b表达最高，随后的实验集中于HTB9/CRL 1749 细胞和miR-141/-200b两个家族成员。抑制miR-141/-200b的表达后发现，膀胱癌细胞的更偏向于间质样状态，侵袭能力增强，MMP-2,9的表达增加和对顺铂的耐药能力增强，增强miR-141/-200b的表达后可得出相反的结果。TGF-β1已证明与很多肿瘤的关系密切，本课题还对TGF-β1的表达、膀胱癌EMT状态和miR-200家族之间的关系作了研究。该部分实验选用了HTB9和T24细胞。研究发现过表达的TGF-β1可抑制miR-141/-200b的表达，使膀胱癌细胞向EMT状态中的间质方向分化，变得更具侵袭性。综合起来，本研究证实了miR-200家族中的miR-141/-200b与膀胱癌的关系尤其密切，其表达若受抑制则肿瘤会向间质样分化，更加具有侵袭性和耐药性；而TGF-β1可以抑制miR-141/-200b的表达，由此本课题提出了一个关于膀胱癌侵袭转移的新机制，即TGF-β1过表达可以抑制miR-141/-200b的表达，miR-141/-200b的表达降低后，膀胱癌细胞将向间质样方向分化，从而更具有侵袭性和耐药性。