衰老调控因子SIRT1与K-ras对话在胰腺癌发生发展中的作用

本课题研究首先检测SIRT1在胰腺癌中表达水平，证实SIRT1在胰腺癌高表达且与预后密切相关，提示SIRT1可能参与胰腺癌恶性表型。在此基础上，本研究构建靶向SIRT1的真核表达质粒并转染胰腺癌细胞，发现明显抑制胰腺癌细胞生长、增殖、转移和耐药，其机制与诱导凋亡、衰老和周期阻滞相关。同时证实SIRT1表达与K-ras表达正相关，通过免疫共沉淀发现SIRT1与K-ras下游信号分子raf结合，提示SIRT1对ras信号通路有调控作用。本研究进一步应用SIRT1的抑制剂EX527和烟酰胺作用胰腺癌细胞，发现可同样抑制胰腺癌细胞的生物学行为，提示SIRT1为胰腺癌的促癌因子。此外，我们研究发现烟酰胺的作用机制除干预SIRT1通路还与抑制ras/Akt信号通路有关，其抑制作用与SIRT1活性被抑制无关，提示烟酰胺可通过直接抑制ras/Akt信号通路抑制胰腺癌。本研究进一步分析正常胰腺、慢性胰腺炎及胰腺癌中SIRT1表达差异，以及其上游HIC1基因启动子甲基化与表达，发现SIRT1在胰腺癌及慢性胰腺炎都有表达上调，而其上游调控因子HIC1则明显发生甲基化而下调，通过去甲基化可以上调HIC1而下调SIRT1，显著抑制胰腺癌细胞的恶性生物学行为，提示HIC1/SIRT1信号参与慢性胰腺炎向胰腺癌的恶性转化。本研究表明，SIRT1为胰腺癌促癌因子，可抑制ras诱导的细胞衰老，同时HIC1的甲基化与SIRT1导致SIRT1表达上调而参与胰腺癌的发生发展。