EB病毒介导的转录调控异常与表观遗传改变及其干预的分子机制

通过本项目的实施，以EBV所致的DNA甲基化改变为重点，以鼻咽癌为模型，从以下三个方面取得了新的科学发现: .1. 以EB病毒编码的LMP1介导的信号通路为切入点，以永生化的鼻咽细胞为模型，证实LMP1不仅能促进野生型p53的核积聚，同时还促进其转录活性和蛋白水平的表达；LMP1通过异常激活MAPK信号转导通路导致p53多个位点的磷酸化，使p53转录活性增加，反式激活能力的增强。LMP1延长了p53与MDM2的蛋白半衰期，但却抑制了MDM2与p53的相互结合。LMP1在抑制MDM2介导的p53 UbK48泛素化降解的同时，促进了TRAF2介导的p53 UbK63泛素化。p53虽然表达上调，但是 p53诱导的细胞周期阻滞及细胞凋亡却在LMP1的作用下受到明显抑制。我们的结果首次证实了在鼻咽癌中LMP1通过异常的泛素化修饰调控p53的生理功能从而参与鼻咽癌的发生发展。.2. 肿瘤细胞的能量代谢重编程是肿瘤的重要生物学特征，是肿瘤各种恶性表型的生化基础，主要涉及糖酵解途径的异常活化以及线粒体功能异常。基于气质联用技术（GC-MS）建立了鼻咽癌患者血清代谢组学谱，发现了鼻咽癌变过程中涉及糖酵解、脂代谢等途径的改变。证实了鼻咽癌细胞及鼻咽癌临床样本中证实LMP1与HK2的表达存在相关性，明确了EBV-LMP1主要通过PI3K/Akt→GSK3β→c-Myc信号通路上调糖酵解途径的关键分子HK2的表达。证实干扰HK2的表达能降低鼻咽癌细胞的有氧糖酵解速率、抑制细胞增殖、诱导细胞凋亡，以及EBV-LMP1活化HK2的临床意义及其与鼻咽癌病人预后的相关性。.3. 明确小分子探针Grifolin活化转录因子p53上调DAPK1表达，证实Grifolin促进ERK1/2与DAPK1相互作用，抑制ERK1/2核积聚，诱导肿瘤细胞凋亡。明确Grifolin调节ERK1/2激酶活性, 靶向ERK1/2-DAPK1-p21通路诱导肿瘤细胞G0/G1期阻滞，发现grifolin主要通过靶向MAPK→ERK1/2→Elk1信号转导通路抑制DNMT1的表达。