9型腺相关病毒介导bFGF和PDGF-BB双基因靶向治疗老龄急性心肌梗死的机制研究

老龄是急性心肌梗死(AMI)发病的高危因素，目前尚无根治AMI的药物和疗法。针对目前心脏疾病基因治疗载体存在心肌的靶向性差、转染效率低、持续时间短、安全性差等缺点，本课题系统的比较了CMV及CBA启动子重组AAV9载体，发现AAV9-CMV载体对心肌有极强的靶向亲和力，是一种理想的心脏疾病基因治疗载体系统；而AAV9-CBA可介导外源基因在肝脏中靶向、长期稳定的高效表达，是较为理想的肝脏疾病基因治疗载体系统，且两启动子重组AAV9载体对心肌酶、肝功及肾功均无影响。使用生长因子实施治疗性促血管新生及再生是目前的研究热点，针对单一促血管生长因子无法激活完成血管新生和成熟的整个调控过程，本课题设计并构建了表达bFGF和PDGF-BB双基因的重组AAV9载体，体外研究显示bFGF和PDGF-BB的过表达可促进HUVEC的血管新生；PDGF-BB通过抑制Bax和Caspase活性降低缺血缺氧诱导的心肌细胞凋亡；体内研究建立了老龄小鼠的AMI模型，AMI 60d后AAV9-bFGF-PDGF-BB治疗组与AAV9-eGFP相比，心肌梗死面积、心肌间质纤维化及左心室重塑程度显著降低，小鼠心功能明显改善；梗死区新生血管密度显著增加，bFGF和PDGF-BB通过上调血管壁平滑肌标志物α-SMA及血管内皮生长因子VEGF的表达促进老龄心肌梗死区血管新生。表明AAV9-bFGF-PDGF-BB靶向转导治疗老龄AMI是有效可行的，为血管新生疗法治疗老龄AMI提供了新的思路。