耶尔森氏菌OmpF蛋白中TRAb识别表位的鉴定及其致Graves'病作用的研究

本课题基本按照项目执行计划，完成了计划任务书中规定的任务。利用生物质谱和蛋白空间结构模拟技术，优化了与TSHR存在交叉免疫原性的小肠耶尔森氏菌OmpF蛋白的空间结构模型，并预测了其TSHR的交叉抗原表位；结合原代甲状腺滤泡细胞功能分析进一步确定了OmpF蛋白上具有功能意义的抗原表位。然后用相应抗原表位免疫新西兰大白兔，并进一步与经典的用Ad-TSHR-289转染建模的方法结合免疫小鼠，研究了上述处理单独/协同对模型动物免疫功能和甲状腺功能的影响，揭示了OmpF蛋白TSHR交叉抗原表位在Graves病发生发展中的作用。利用本课题的研究结果和技术以及建立的Graves病小鼠模型，我们进一步证明了天然药物diosgenin能通过抑制甲状腺细胞增殖减轻Graves病小鼠甲状腺肿大，并且这一作用与其抑制IGF-1, NF-κB, cyclin D1和PCNA的表达有关。此外，利用本课题的甲状腺滤泡细胞和Graves病小鼠模型，我们还揭示了在甲状腺细胞上存在腺苷受体A2a的表达，它能通过激活cAMP/PKA/CREB信号通路，并进一步活化PGC-1α和HIF-1α，使VEGF表达上调，在Graves病IgG诱导的甲状腺细胞VEGF表达中发挥重要作用。上述研究揭示了TSHR免疫耐受破坏和TRAb的产生机制，为阐明YE蛋白在GD发生发展中的作用，认识感染在自身免疫疾病中的作用提供了重要资料。并且揭示了Graves病患者IgG诱导的甲状腺肿大的重要机制，还为发现新的治疗药物提供了关键实验基础，具有重要的临床意义。