蓝藻藻胆体杆中藻蓝蛋白和连接蛋白相互作用及其分子机制的研究

蓝藻藻胆体中各种藻胆蛋白的三维结构已经被解析，而连接蛋白的三维结构信息却很少，从而严重制约了藻胆蛋白与连接蛋白相互作用机制的研究。本研究首先利用我们已建立的基于氨基酸序列预测蛋白质间相互作用面的计算生物学方法，以藻蓝蛋白与杆连接蛋白（LR）为对象，分别预测藻蓝蛋白的α亚基和β亚基与LR之间的相互作用面，并根据序列保守性，进一步预测相互作用面内可能的关键相互作用位点。然后，以海洋聚球藻Synechococcus sp. PCC 7002为材料，利用大肠杆菌双杂交系统，研究LR与藻蓝蛋白α亚基和β亚基之间相互作用的强弱。最后，对预测到的关键相互作用位点实施单点或多点突变，系统研究连接蛋白突变体功能的变化，进一步验证上述相互作用面和相互作用位点预测的准确性，最终构建连接蛋白与藻胆蛋白相互作用的分子机制模型。研究结果有助于阐明蓝藻藻胆体超分子体系的分子组装机制和能量传递过程，具有重要的理论意义