猪睾丸组织新miRNA分离鉴定及其对精子性状关键基因的遗传控制

miRNA是真核细胞中一大类参与基因转录后调控的非编码小RNA，在动物繁殖等过程中起重要作用，但目前miRNA通过对关键基因转录后调控而介导精子性状形成的遗传机制尚不清楚。本项目拟采用微小RNA文库特异性克隆结合同源扩增，分离鉴定猪睾丸组织表达的新miRNA，分析不同发育时期睾丸组织miRNA表达模式；利用生物信息学软件预测靶基因，并筛查miRNA靶位点区域SNP，在本室大白猪等猪群中开展SNP与精子性状关联分析；利用本室已建立RNAi技术，一方面依据新miRNA前体环状部位序列设计siRNA，对miRNA进行基因敲减，另一方面通过miRNA报告系统，构建靶位点SNP的不同等位基因片段表达载体，分别与双荧光素酶报告载体共转染，检测靶基因或报告基因表达情况，以全面研究miRNA对精子性状关键基因表达的控制。本研究为公猪繁殖性能分子改良提供科学依据，并为猪基因组学研究积累新资料。