壮汉族糖尿病家系的PGC-1α基因Gly482Ser变异分析及突变蛋白功能研究

PGC-1α基因Gly482Ser变异恰好位于其肌肉增强因子2C（MEF2C）结构域内，而MEF2C是骨骼肌葡萄糖转运子（GLUT4）的启动子，因此PGC-1α-MEF2C-GLUT4通路可能参与了糖尿病发病。Gly482Ser变异对该通路的影响如何，是本课题的研究重点。研究分为两大部分：■遗传学研究：招募南宁地区壮汉民族2型糖尿病（T2DM）杂合子家系各150个。经相对危险度分析（HRR）和传递不平衡检验（TDT）探讨482位变异与T2DM之间是否存在连锁不平衡关系，并比较两民族异同。■突变蛋白功能研究：(1)克隆PGC-1α基因MEF2C结构域并行482位定点诱变产生突变型。（2）大肠杆菌双杂交实验观察野生型和突变型蛋白与其配体MEF2C间结合力的变化。（3）野生和突变型分别转染小鼠骨骼肌C2C12细胞，观察GLUT4表达和胰岛素刺激下的葡萄糖摄取率改变以及葡萄糖氧化、合成代谢的变化。