抗草甘膦牛筋草EPSPS基因的表达调控机理
批准号:
31301683
项目类别:
青年科学基金项目
资助金额:
22.0 万元
负责人:
张纯
依托单位:
学科分类:
农田草害、鼠害及其他有害生物
结题年份:
2016
批准年份:
2013
项目状态:
已结题
项目参与者:
田兴山、冯莉、杨彩宏、张泰劼、吴丹丹
中文摘要
我们新近研究结果显示,在喷洒草甘膦之后,抗性牛筋草中草甘膦靶标酶基因EPSPS的mRNA表达量显著上调,而在敏感性牛筋草中该基因表达量变化不明显,推测这可能是牛筋草对草甘膦产生抗药性的原因之一。植物基因的表达是通过其上游调控序列中某些顺式作用元件和细胞核中的转录因子协同调控的,但具体是哪些作用元件和转录因子调控EPSPS基因表达,目前未见报道。因此,本项目拟在前期工作基础之上,通过对抗草甘膦牛筋草EPSPS基因调控序列的克隆、功能分析以及相关转录调控因子的分离与鉴定,探究调控牛筋草EPSPS基因表达的关键顺式元件及转录因子,阐明牛筋草EPSPS基因表达调控机理,并进一步充实转EPSPS基因抗草甘膦作物研究的理论基础。
英文摘要
To study the mechanisms of Eleusine indica resistance to glyphosate, we recently found that after been sprayed glyphosate, the expression of target enzyme gene EPSPS was significantly up-regulated in Glyphosate-resistance biotype of eleusine indica. But the EPSPS gene expression have no significant change in Glyphosate sensitive biotype of Eleusine indica. We speculated that up-regulation of EPSPS gene is one of reasons of Eleusine indica resistant to Glyphosate. Gene expression is co-regulated by some upstream regulatory factors after picked up the glyphosate signal. However, what factors regulate the expression of EPSPS gene have not been reported. Therefore, this project try to analysis the regulatory factors of EPSPS gene expression on the base of previous work. Cloning and analyses the regulatory sequence of EPSPS gene first, and then isolation and identification of the transcription factor regulation from glyphosate-resistance Eleusine indica . This study will help us to understand the key role factors and mechannism of EPSPS gene expression, and it could also enrich the theoretical basis of development of transgenic glyphosate-resistant crops which been transferred of exogenous EPSPS gene.
草甘膦靶标酶EPSPS基因的表达量增加是杂草抵抗草甘膦胁迫的主要分子机制,但EPSPS基因转录水平的表达调控机理鲜有研究。本项目以敏感型和抗草甘膦牛筋草为材料,对EPSPS基因转录水平的表达调控机理进行了初步研究,较好的完成了项目预期内容。取得了重要的研究进展:1)通过HiTail-PCR的方法克隆了牛筋草EPSPS基因上游启动子序列,获得两条启动子序列Epro-S(862bp)和Epro-L(877bp),生物信息学分析显示两者同源性为99%,主要序列差异存在于5’UTR Py-rich Strech 元件上,Epro-S和Epro-L序列上的5’UTR Py-rich Strech 元件序列分别命名为5ups-S和5ups-L。 2)启动子缺失实验表明, 5’UTR Py-rich Strech 元件的序列差异是导致Epro-L活性显著高于Epro-S活性得重要原因;3)Pull-down和EMSA结果显示,核酮糖-1、5-二磷酸羧化酶/加氧酶大亚基(rbcL)能与5ups-L元件相结合,却不能与5ups-S结合,编码rbcL蛋白的Ei-rbcl基因转录水平的表达量受草甘膦诱导显著上调。以上结果表明,核酮糖-1、5-二磷酸羧化酶/加氧酶大亚基(rbcL)可能具有转录因子的功能,能够与5ups-L元件结合调控EPSPS基因表达。研究结果为进一步深入了解牛筋草EPSPS基因的表达调控机理提供重要的实验证据。
期刊论文列表
专著列表
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DOI:
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发表时间:
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期刊:
分子植物育种
影响因子:
--
作者:
[张纯, 王田, 冯莉, 田兴山]
通讯作者:
田兴山
DOI:
10.1016/s2095-3119(14)60890-x
发表时间:
2015-05
期刊:
Journal of Integrative Agriculture
影响因子:
4.8
作者:
[Chun Zhang;Li Feng;Tingting He;Caiyun Yang;Guozhi Chen;X. Tian]
通讯作者:
Chun Zhang;Li Feng;Tingting He;Caiyun Yang;Guozhi Chen;X. Tian
sRNA耦合LDH-硅基复合纳米载体防控抗草甘膦牛筋草的作用机理
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批准号:32572860
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项目类别:面上项目
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资助金额:50.00万元
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批准年份:2025
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负责人:张纯
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依托单位:
EPSPS基因复增驱动牛筋草对草甘膦抗性快速进化的分子机制
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批准号:--
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项目类别:面上项目
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资助金额:54万元
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批准年份:2022
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负责人:张纯
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依托单位:
EPSPS基因5'端非翻译区串联重复序列介导牛筋草抵抗草甘膦的调控机制
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批准号:31871984
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项目类别:面上项目
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资助金额:59.0万元
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批准年份:2018
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负责人:张纯
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依托单位:
国内基金
海外基金