联苯和氧芴生物合成相关基因的克隆与功能分析

联苯（biphenyl）和氧芴（dibenzofuran）是酚类植物次生代谢产物，是苹果亚科（蔷薇科）植物的植保素。由于缺乏适合的实验体系，联苯和氧芴的生物合成途径研究一直是个空白。最近，我们用酵母提取物处理欧洲花楸（Sorbus aucuparia L.）悬浮细胞，成功地建立了联苯和氧芴生物合成的诱导体系，用实验方法证明了联苯合酶（biphenyl synthase，BIS）的存在，并克隆了3个BIS基因，本项目拟在已建立的联苯和氧芴生物合成诱导体系基础上，构建一个差异表达的消减cDNA文库，结合ESTs测序和公共数据库检索等方法确定一批与联苯和氧芴生物合成相关的候选基因，并通过适当的异源表达体系和体外酶促反应验证2-3个候选基因的生化功能，探讨它们在联苯和氧芴生物合成中的作用。同时，获得的ESTs序列将为克隆这条代谢途径上的其它基因及研究该代谢途径表达的调控等工作奠定基础。