LIGHT－LTβR/HVEM信号通路在Ⅰ型糖尿病β细胞损伤中的作用及机制研究

I型糖尿病(T1DM)是一种Ｔ细胞介导的自身免疫性疾病，T细胞的持续活化导致β细胞损伤是T1DM病情发展中的一个重要环节。LIGHT是近年发现的共刺激分子，在T细胞的活化中起着重要的作用。我们的前期研究发现LIGHT在Th1细胞极化中起着关键的作用，但其是否参与T1DM中T细胞介导的β细胞损伤尚不清楚。本研究以小鼠胰岛细胞系Min6和LIGHT基因敲除的NOD/Lt小鼠为研究对象，对LIGHT-HVEM/LTβR信号通路在T1DM β细胞免疫损伤中的作用及其效应机制进行了探讨。结果表明：LIGHT及其受体HVEM/LTβR的表达在NOD/Lt小鼠病情发展过程中均有明显的上调；重组的LIGHT可显著促进IFN-γ 对原代胰岛细胞和胰岛细胞系Min6活性的抑制作用；这种抑制作用主要是导致了细胞的死亡，而死亡原因是由凋亡引起的，这从激光共聚焦，FACS和DNA电泳结果均得到证实。进一步的研究表明LIGHT信号途径诱导胰岛细胞凋亡的可能机制为：LIGHT与其受体的结合促进了IFN-γ 活化转录因子Stat1的活化，后者抑制了NF-κB活化；导致依赖于NF-κB的抗凋亡分子BCL-2表达下调，促凋亡基因Bax,Bak,Bad的表达则上调，从而使线粒体中Cyto C的释放增加，激活了Caspase-8, 9和Caspase-3，活化PARP，导致DNA片段化，最终引发凋亡。与体外结果一致的是，LIGHT基因缺失的NOD/Lt小鼠糖尿病发病率显著低于野生型的NOD/Lt小鼠，并且胰岛表面淋巴细胞的浸润明显减轻。我们的研究表明LIGHT信号通路通过参与Caspases级联活化在T1DM β细胞免疫损伤中扮演着重要的角色，该研究不但有助于阐明LIGHT通路在T1DM β细胞免疫损伤的效应机制，而且为T1DM临床治疗研究提供了新的思路和方法。