VIP增强RSV感染后I型干扰素产生及其信号传导在宿主抗病毒效应中的作用机制研究

批准号：

82070013

项目类别：

面上项目

资助金额：

55.0 万元

负责人：

刘恩梅

依托单位：

重庆医科大学

学科分类：

呼吸系统感染、炎症与免疫

结题年份：

2024

批准年份：

2020

项目状态：

已结题

项目参与者：

刘恩梅

关键词：

干扰素 α/β 呼吸道合胞病毒血管活性肠肽抗病毒效应

项目摘要

结项摘要

刘恩梅的其他基金

相似基金

相关文献

中文摘要

呼吸道合胞病毒（respiratory syncytial virus，RSV）是引起婴幼儿急性下呼吸道感染最常见的病毒病原，阻断RSV对I型干扰素α/β（IFN-α/β）产生及其信号传导的抑制作用是治疗RSV疾病重要方向。课题组前期研究发现：血管活性肠肽（Vasoactive intestinal peptide，VIP）可促进RSV感染后IFN-α/β产生，增强其信号转导。本研究拟利用VIP全基因敲除小鼠及原代细胞模型，深入研究RSV感染后：（1）VIP是否结合VPAC1，激活PKA或PKC信号通路，发挥抗RSV效应；（2）VIP是否通过增加RIG-1泛素化水平诱导IFN-α/β分泌；（3）VIP是否通过增加IFNAR1表达增强IFN-α/β信号传导；（4）白藜芦醇能否诱导内源性VIP产生。研究结果有望为临床治疗RSV感染提供新策略。

英文摘要

Respiratory syncytial virus (RSV) is the most common viral pathogen causing acute lower respiratory tract infections in infants. An important direction of RSV treatment is blocking the inhibition of interferon α/β (IFN-α/β) production and its signal transduction by RSV infection. Our previous research confirmed that: vasoactive intestinal peptide (VIP) can promote IFN-α/β production and enhance its signal transduction post RSV infection. This study intends to employ VIP gene conventional knockout mice and primary cell models, to further explore: (1) Whether VIP binds VPAC1 to activate PKA or PKC signaling pathways, which exerts anti-RSV effects; (2) Whether VIP increases the level of RIG-1 ubiquitination post RSV infection to induce IFN-α/β Secretion; (3) Whether VIP increases IFNAR1 expression post RSV infection to enhance IFN-α/β signal transduction; (4) Whether resveratrol can induce endogenous VIP production. The research results are expected to provide new strategies for clinical treatment of RSV infection.

呼吸道合胞病毒（RSV）是引起婴幼儿急性下呼吸道感染的主要病因，RSV能够抑制宿主I型干扰素（IFN-α/β）的产生，实现免疫逃逸并加重病情。课题组前期研究发现：RSV 感染去除肺C 类神经纤维（KPCFs）的小鼠模型中，支气管肺泡灌洗（BALF）中IFN-α/β水平升高，肺组织匀浆RSV滴度显著下降，进一步发现KPCFs小鼠BALF中血管活性肠肽（VIP）明显升高。VIP是宿主体内最丰富神经肽之一，调节多种生理功能，具有抗单纯疱疹病毒、HIV等感染作用，具体机制尚不明确。本项目旨在探讨VIP在RSV感染中发挥的作用，重点分析VIP对I型干扰素（IFN-α/β）产生的影响以及其诱导IFN-α/β表达的作用机制。研究结果显示：（1）动物模型中敲除VIP可抑制RSV感染后IFN-α/β表达，促进RSV感染，表明VIP发挥抗病毒免疫作用。（2）流式细胞术（FACS）检测RSV感染后肺组织单细胞悬液，明确VIP发挥抗RSV作用的主要效应细胞是肺泡巨噬细胞。（3）VIP显著诱导肺泡巨噬细胞产生IFN-α/β，抑制RSV复制。（4）VIP通过与干扰素跨膜蛋白3（IFITM3）结合，通过IFITM3发挥抗RSV作用。（5）白藜芦醇抑制RSV感染后肺泡巨噬细胞MH-S产生内源性VIP。（6）构建了VIP-Fc融合蛋白在体外和体内实验中展现出更好的稳定性和更强的抗病毒效果，相比天然VIP对RSV的抑制作用更为显著。综上所述：本研究通过建立RSV感染体内外模型，利用敲除（减）VIP、流式细胞术、去神经模型、质谱分析等研究方法，发现肠道来源的VIP通过调控肺泡巨噬细胞影响病毒感染和宿主抗病毒免疫，深化了对肺肠轴在神经免疫调控中的作用机制的理解，并证明VIP通过与IFITM3结合，诱导IFN-α/β的产生，抑制RSV复制，发挥抗病毒效应；进一步针对VIP半衰期短、分子量小不稳定的问题，成功构建VIP-Fc融合蛋白，证明其有望成为潜在的抗病毒治疗药物。本研究有望为进一步深入探讨神经-免疫调控在RSV感染中的重要作用，认识肺肠轴对肺部疾病的调控机制奠定理论基础，同时为RSV防治新策略提供科学依据。标注该项目基金号SCI论文发表3篇，1篇投稿中，申请国家发明专利1项，培养毕业博士、硕士研究生各1名，在读博士、硕士研究生各1名，项目申请人获批首届国家杰出医师。