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RLP23-SOBIR1复合体介导连作地黄免疫应答紊乱的分子机制

批准号:
82073962
项目类别:
面上项目
资助金额:
55.0 万元
负责人:
古力
依托单位:
学科分类:
中药资源
结题年份:
2024
批准年份:
2020
项目状态:
已结题
项目参与者:
古力

项目摘要

结项摘要

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中文摘要
连作障碍是中药材生产和资源可持续发展的重大难题。植物免疫识别受体能感知外界胁迫并激活下游免疫响应。项目前期发现免疫应答紊乱是导致地黄连作障碍的重要原因,LRR-RLP23与其共受体激酶SOBIR1广泛参与了该过程。据此,本项目拟研究:①在测定连作地黄专化致病菌候选效应蛋白侵染效应的基础上,鉴定LRR-RLP23特异性识别的效应因子;②利用酵母双杂交、GST pull-down和BiFC技术确证RLP23-SOBIR1复合体及其下游靶标蛋白;③利用反向遗传学结合地黄受害表型特征,明确RLP23-SOBIR1与下游靶标蛋白的功能依赖性关系。研究最终将阐明RLP23-SOBIR1复合体介导连作地黄免疫应答紊乱的分子机制,为通过免疫锻炼的方式弥补和提升连作地黄抵御专化病原菌侵害的能力、深化中药资源生态学和分子生药学研究、实现中药材生产的可持续发展提供理论依据和技术支撑。
英文摘要
Continuous cropping obstacle is a major problem in the production and the sustainable development of Chinese medicinal herbs. Plant immune recognition receptors can sense external stimuli and activate downstream immune responses. Our previous study showed that the immune response disorder is an important reason for the continuous cropping obstacle of Rehmannia glutinosa Libosch, and that LRR-RLP23 and its co-receptor kinase SOBIR1 participate in this process. Based on this, the project will: (1) identify the effector specifically recognized by LRR-RLP23 on the basis of determining the infective effect of candidate effector proteins of specialized pathogens in the continuous cropping of R. glutinosa; (2) identify the RLP23-SOBIR1 complex and its downstream target proteins by BiFC technology; (3) clarify the functional dependence relationship between RLP23-SOBIR1 and downstream target protein using reverse genetics combined with R. glutinosa phenotypic characteristics. The project will eventually clarify the molecular mechanism of RLP23-SOBIR1 complex mediated immune response disorder in continuous cropping of R. glutinosa. It will also provide the theoretical basis and technical support for improving the resistance level of replanted R. glutinosa against specialized pathogens through immunological training, deepening the research of Chinese medicine resource ecology and molecular pharmacy, and achieveing sustainable development of Chinese medicine production.
连作障碍是中药材生产和资源可持续发展的重大难题。越来越多的证据表明:连作障碍的诱发是“植物-土壤-微生物”系统中各种量效关系综合作用的结果,其中根际微生态失衡诱发的植物免疫应答系统紊乱是导致连作障碍的关键。本研究以植物应对病原微生物入侵的第一道防线PTI免疫系统入手,以广泛参与连作胁迫响应的免疫识别受体RgRLP23及其共受体激酶RgSOBIR1为重要抓手,在地黄专化致病菌(尖孢镰刀菌CCS043)全基因组测序的基础上,利用生物信息学手段和地黄离体叶片侵染效应验证完成了关键效应因子的特异性筛选和鉴定。同时,通过反向遗传学手段对RgRLP23和 RgSOBIR1的生物学功能验证的基础上,利用BiFC和Y2H技术确证了二者的互作关系。此外,利用磷酸化蛋白组学和GST pull-down联合质谱检测,构建了以钙信号、MYB和E3泛素化为核心成员的下游候选靶标蛋白文库,并利用BiFC和酵母双杂交技术(Y2H)确证了RgSOBIR1和关键候选靶标蛋白RgMYB和RgCDKP的互作关系。最后,通过双遗传转化技术手段确证了RLP23-SOBIR1复合体及其下游靶标蛋白之间的功能依赖性关系,阐释了连作条件下地黄免疫应答紊乱介导体内细胞ROS爆发,进而由过氧化导致块根中木质素异常沉积的膨大受阻或死亡现象的发生路径和潜在机制。本研究为深入解读地黄连作障碍诱因和开展消减技术策略研究提供了关键的证据链条和有效抓手。
木质化介导的连作地黄块根膨大受阻的分子机制
  • 批准号:
    81603243
  • 项目类别:
    青年科学基金项目
  • 资助金额:
    17.0万元
  • 批准年份:
    2016
  • 负责人:
    古力
  • 依托单位:
国内基金
海外基金