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整合素连接激酶在人脐带间充质干细胞中的过度表达治疗放射性溃疡的实验研究

批准号:
82060352
项目类别:
地区科学基金项目
资助金额:
34.0 万元
负责人:
刘忠山
依托单位:
学科分类:
创面愈合与瘢痕
结题年份:
2024
批准年份:
2020
项目状态:
已结题
项目参与者:
刘忠山

项目摘要

结项摘要

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中文摘要
放射性皮肤溃疡是由恶性肿瘤的治疗、核事故等引起,由于反复复发而给患者带来巨大痛苦。目前以皮瓣移植、高压氧疗、VSD负压封闭吸引等治疗为主,难治和复发率高。近年,细胞治疗作为一种新的治疗方法,也应用于慢性创面的修复,而脐带来源的间充质干细胞(hUCMSCs)取材方便,无伦理学争议,成为修复的主要种子细胞。但hUCMSCs移植后存活率的下降,极大地限制了细胞治疗的有效性。如何提高细胞移植中hUCMSCs的存活率?利用基因工程改善间充质干细胞的功能可能是提高干细胞效率的一种可行的方法。整合素连接激酶(Integrin linked kinase,ILK)是一种丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶,参与调节细胞增殖、分化、存活和凋亡、血管生成等。本课题拟采用整合素连接激酶在脐带间充质干细胞中过表达,修复放射性溃疡,通过体内外实验观察治疗作用并深入探讨治疗机制,为开发新的慢性创面治疗技术和药物提供理论依据
英文摘要
Radiation skin ulcer is caused by the treatment of malignant tumors, nuclear accidents and so on, which brings great pain to patients due to repeated recurrence. At present, skin flap transplantation, hyperbaric oxygen therapy, VSD vacuum sealing and suction are the main treatment, which is difficult to treat and has a high recurrence rate. In recent years, as a new treatment method, cell therapy has also been applied to the repair of chronic wounds. However, the cord derived mesenchymal stem cells (ucmscs) are easy to obtain and have no ethical dispute, and become the main seed cells for repair. However, the decline of survival rate after transplantation of hUCMSCs greatly limits the effectiveness of cell therapy. How to improve the survival rate of hUCMSCs in cell transplantation? Improving the function of mesenchymal stem cells by genetic engineering may be a feasible way to improve the efficiency of stem cells. Integrin linked kinase (ILK) is a serine threonine protein kinase, which is involved in the regulation of cell proliferation, differentiation, survival and apoptosis, angiogenesis and so on. In this study, integrin linked kinase was overexpressed in umbilical cord mesenchymal stem cells to repair radiation ulcer. The therapeutic effect was observed in vitro and in vivo, and the therapeutic mechanism was discussed in depth, which provided theoretical basis for the development of new chronic wound treatment technology and drugs.
放射性皮肤溃疡至今仍是临床放疗和放射医学亟待解决的一大难题,也给患者带来极大痛苦,但是目前临床上采用的多种方法都达不到兼具促进创面愈合和保护创面的作用,因此有必要寻找新的和有效的治疗方法,脐带来源的间充质干细胞(hUCMSCs)具有自我复制、多向分化、迁移、调节免疫等能力,可作为理想的种子细胞用于衰老和病变引起的组织器官损伤修复。但hUCMSCs移植后存活率的下降极大地限制了细胞治疗的有效性。因此本实验通过制作大鼠放射性皮肤溃疡模型,将通过基因工程改善后的间充质细胞用于治疗放射性溃疡,观察对放射性溃疡的修复作用。.本研究制作大鼠放射性皮肤溃疡模型,将过表达ILK 的间充质干细胞用于治疗,寻找放射性皮肤溃疡治疗的新方法,并对其修复机制进行初步探讨。第一部分,脐带间充质干细胞的获取,构建过表达ILK 的脐带间充质干细胞系。通过ELISA检测P3代培养基上清液CD86、CD163、EGF、VEGF、PCNA、K14的蛋白含量,了解hUCMSCs的旁分泌效应,为hUCMSCs修复创面作用寻找理论依据。第二部分,通过大体观察、创面愈合率比较、显微结构改变,以及肉芽组织厚度测定(光镜)等检测指标,发现ILK-hUCMSCs促进创面修复作用。第三部分,通过体内实验,应用免疫组化及Western blot方法,检测创面组织增殖细胞核抗原、凋亡相关基因探讨ILK-hUCMSCs对细胞增殖、细胞凋亡的影响。第四部分,探讨可能参与hUCMSCs修复放射性皮肤溃疡修复的信号通路的作用机制。于2021.1.1-2021.12.30完成hUCMSCs的获取培养扩增及鉴定的研究;于2022.1.1-2022.12.30 完成了过表达ILK对移植细胞成活的影响;于2023.1.1-2023.12.30完成应用ILK-hUCMSCs修复大鼠放射性皮肤溃疡的作用研究;于2024.1.1-2024.12.30 完成ILK-hUCMSCs修复大鼠放射性皮肤溃疡的机制研究。在项目执行期间,发表SCI论文1篇,中文核心期刊论文 3 篇,培养硕士研究生 4名。.该项目的实施为放射性皮肤溃疡发病机制的研究及hUCMSCs修复创面机制的研究开辟了新的领域,并有可能为放射性皮肤溃疡的诊治找到新的方法,将有利于临床上hUCMSCs的推广应用,具有很高的社会效益和经济效益。
异位高表达Oct4的脐带间充质干细胞通过抑制ROS和激活Nrf2信号通路抗皮肤衰老的作用研究
  • 批准号:
    82460450
  • 项目类别:
    地区科学基金项目
  • 资助金额:
    32.00万元
  • 批准年份:
    2024
  • 负责人:
    刘忠山
  • 依托单位:
国内基金
海外基金