西藏地区不同动物HEV流行趋势调查、进化分析及感染性研究
批准号：
32060792
项目类别：
地区科学基金项目
资助金额：
35.0 万元
负责人：
贡嘎
依托单位：
学科分类：
兽医病毒学
结题年份：
2024
批准年份：
2020
项目状态：
已结题
项目参与者：
贡嘎
项目摘要
结项摘要
相似基金
相关文献
中文摘要
戊型肝炎病毒（HEV）是严重危害人类健康及畜牧业发展的病原体之一。近年来，国内外关于各物种HEV感染的报道日益增多，尤其是在中国，如云南、山东、上海等省市。西藏地域辽阔，动物资源丰富，但是受限于环境、海拔等因素的影响，西藏各动物HEV流行趋势还鲜有报道。目前，在西藏除部分地区藏猪群中具有HEV流行的报道外，其他动物HEV研究处于空白。本项目基于本团队前期在藏猪HEV研究的基础上，拟全面、针对性的调查西藏地区各动物（包括藏猪、牦牛、藏羊，共计3种）HEV的感染情况；分离并鉴定优势毒株的基因型及基因亚型；并在细胞水平分析西藏地区优势毒株的感染特性。从分子和细胞水平揭示西藏地区各动物HEV流行趋势、进化分析及优势毒株感染性，为西藏地区各动物HEV进一步研究及跨种间传播风险提供理论依据。
英文摘要
Hepatitis E virus (HEV) is a pathogen that seriously endangers human health and animal husbandry. In recent years, more and more research has reported that the HEV had high prevalence in various species in the world, especially in China, such as Yunnan, Shandong, Shanghai and other provinces or cities. The Tibet has a vast territory and abundant animal resources, but the trend of HEV infection in various species in Tibet are still unknow. Our previous study found that HEV has a high prevalence in Tibetan pigs. So, we suspected that other species in Tibet also have HEV infection. Based on the previous study, this project plans to comprehensively and specifically investigate the prevalence of HEV infection in various species in Tibet (including Tibetan pigs, Tibetan sheep, yak, a total of 3cases); isolate the dominant strain and identifications of genotype and gene subtype; and analysis of characteristics about isolated HEV strain at the cellular level. The molecular and cellular levels are used to reveal the epidemic trends of HEVs of various animals in Tibet and the infectivity of the dominant strains, which provides a theoretical basis for further research and cross-species transmission risk of HEVs of various animals in Tibet.
戊型肝炎病毒(HEV)是危害人类健康及畜牧业发展的病原体之一。近年来，国内外关于各物种HEV感染的报道日益增多，但在西藏关于动物HEV相关研究相对较少。系统掌握西藏不同地区不同动物HEV流行趋势、基因信息以及病毒感染特性对该病的进一步研究和防控具有重要的意义。鉴于此，项目组通过不同实验方法对采集的不同样本进行HEV血清特异抗体/抗原、HEV-RNA流行趋势、病毒基因组、基因分型以及感染性研究。结果显示，藏猪、藏羊、牦牛HEV-IgG总阳性率分别为32.54%、9.59%、18.05%；HEV-IgM总阳性率分别为21.30%、3.14%、6.09%；HEV-Ag总阳性率分别为7.69%、2.36%、4.06%。藏猪粪便和组织中HEVRNA阳性率分别为7.81%和3.31%，牦牛粪便中HEVRNA阳性率为1.11%。所有检测到的阳性样本均为HEV4d基因型。从不同季节分析来看，夏季阳性率最高，其次是秋季和春季，冬季未检测到RNA阳性样品。藏猪粪便样本中HEV病毒拷贝数为3.53×10^4-2.72×10^6copies/mL。藏猪肝脏拷贝数为3.15×10^3-2.81×10^4copies/mL。牦牛粪便拷贝数为1.9×10^4copies/mL。所采集的三种动物不同组织样本中有不同程度的定位出戊型肝炎病毒抗原且HE染色实验结果显示不同动物不同组织均有不同程度的病理损伤现象。HEV体外培养感染性的鉴定研究，通过免疫荧光结果显示，在A549细胞、Huh-7细胞和HepG2/C3A在接种72h后，通过病毒能在体外大量复制。免疫荧光共聚焦分析，发现HEV可以在A549细胞、Huh-7细胞和HepG2/C3A细胞中高效复制。以上结果表明，本研究分离出的HEV可以在这些细胞进行体外培养并进行有效复制。同时，通过荧光定量PCR方法检测病毒载量，结果发现病毒接种后2、6和11天检测到病毒载量并逐渐增高。并通过电镜成功观察到HEV接种后6天细胞悬浮液中的病毒颗粒，证实我们成功地从猪中分离出HEV，并且HEV在A549细胞，Huh-7细胞和HepG2/C3A细胞中有效地复制。在本项目的资助下，共发表论文6篇，SCI三篇，中文3篇。本项目从分子和细胞水平揭示西藏地区各动物HEV流行趋势、进化分析、基因分型及优势毒株感染性，为西藏地区各动物HEV进一步研究及防控提供理论依据。
国内基金
海外基金